乌拉草分布于中国东北部。乌拉草具有保暖、抑菌等功能。而黄酮是乌拉草中的主要活性成分之一,其具有较高的生物活性和研究价值。本论文主要对乌拉草黄酮进行提取、纯化工艺优化,并研究了乌拉草黄酮化学成分和生物活性。1.采用传统乙醇热回流提取乌拉草黄酮化合物。确定单因素实验结果为:乙醇浓度50%、液料比30 g/mL、提取时间90 min、提取温度70℃。在单因素实验的基础上,以乌拉草总黄酮的提取率(%)为响应值,进行响应面试验设计,得到的最佳提取工艺为乙醇浓度是49%,液料比是30 mL/g、提取时间是91 min、提取温度是70℃,乌拉草总黄酮的最佳提取率为6.24±0.04%。2.通过静态和动态吸附,以吸附率、解吸附率和回收率为指标从AB-8、D101、X-5、S-8、NKA-Ⅱ和聚酰胺六种大孔树脂中筛选出AB-8作为最佳纯化树脂;采用层次分析法(AHP)结合响应面法(RSM),确定纯化最优条件为:上样液浓度:3.04 mg/mL,乙醇浓度:70.33%乙醇,pH值:2.93,洗脱流速:2.95 BV/h。黄酮纯度由11.72±0.1%提升至56.00±0.68%。利用层次分析法计算回收率、纯度、脱色率三种纯化指标的权重系数并计算综合得分,纯化工艺条件更具可靠性和科学性。3.用高效液相-质谱联用技术(HPLC-MS)对纯化后的乌拉草黄酮结构进行定性分析。鉴定出八种黄酮类化合物和一种苯丙素类化合物,分别为:儿茶素、山奈酚-3,7-2-O-葡萄糖苷、异夏佛塔苷、荭草甙、木犀草素葡萄糖苷酸、芦丁、木犀草素-7-O-β-d葡萄糖苷酸、木犀草素、异绿原酸(二咖啡酰奎宁酸)。采用保留值对标法及混标峰形一致性对比,鉴定出七种黄酮类化合物和一种苯丙素类化合物,通过解析表明:木犀草素与HPLC-MS推测相符。没食子儿茶素、表没食子儿茶素和表儿茶素、绿原酸分别与HPLC-MS推测中的儿茶素、异绿原酸互为同分异构体;柚皮苷、杨梅素、异鼠李素与HPLC-MS推测不符。并通过紫外光谱法与对照品进行对比,结果表明:没食子儿茶素、柚皮苷、杨梅素、木犀草素、异鼠李素、绿原酸、五种标准黄酮类化合物和一种苯丙素类化合物与纯化后乌拉草黄酮中的各组分光谱图相符,表没食子儿茶素和表儿茶素不符合。4.采用纯化前后乌拉草黄酮进行抗氧化和抑菌活性对比,试验结果可知,纯化后黄酮对DPPH清除率接近VC,对羟基自由基的清除率、还原力的清除率均略高于VC;纯化后的黄酮对大肠杆菌的抑制活性最强,对大肠杆菌的(MIC=0.875)比氯霉素(MIC 3.12)还要低3.5倍。纯化后乌拉草黄酮的抗氧能力和抑菌活性好于提取后。