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[目的]
通过观察经阴道超声辐照后,不同天数取胚的绒毛滋养细胞的凋亡指数,以及绒毛中凋亡相关蛋白Bcl-2及活化Caspase-3的表达情况;来探讨阴道超声辐照对人胚绒毛滋养细胞凋亡的影响及其可逆性,并探索Bcl-2蛋白及活化Caspase-3蛋白在滋养细胞凋亡中的作用,进而探索阴道超声辐照致绒毛滋养细胞损伤在分子水平发生的变化。以期为阴道超声在临床的使用提供分子水平的论据,对阴道超声在围产及生殖医学等领域的安全使用提供指导意义。
[方法]
1.运用末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记检测法(TUNEL),检测未经超声辐照及经阴道超声辐照10min后,分别于1天、3天、5天、7天行人工流产术所取得的人胚绒毛滋养细胞的凋亡指数。
2.运用免疫组织化学SABC法,检测未经超声辐照及经阴道超声辐照10min后,分别于1天、3天、5天、7天行人工流产术所取得的人胚绒毛滋养细胞中Bcl-2蛋白及活化Caspase-3蛋白的表达情况。
[结果]
阴道超声辐照对滋养细胞凋亡有影响。经阴道超声辐照10min后,1天人胚绒毛滋养细胞的凋亡指数最高、Bcl-2蛋白的表达最少、活化Caspase-3蛋白的表达最多;随着时间的推移,凋亡指数逐渐下降、Bcl-2蛋白表达的量逐渐增加、活化Caspase-3蛋白表达的量逐渐减少;凋亡指数5天开始与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)、Bcl-2蛋白表达的量3天开始与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)、活化Caspase-3蛋白表达的量5天开始与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
[结论]
阴道辐照引起人胚滋养细胞凋亡增加,随着时间的推移,细胞凋亡减少,5天后基本恢复正常。同时滋养细胞的凋亡指数与其Bcl-2蛋白、活化Caspase-3蛋白的表达呈相关性,说明Bcl-2蛋白、活化Caspase-3蛋白在滋养细胞凋亡中起着重要作用。尽管本研究表明,经阴道超声辐照后细胞凋亡水平可以逐步回复至正常,也不足以证明对人类胚胎的继续发育不会产生不良影响。因此,早孕期间选择阴道超声检查仍应慎重。