解磷解钾特异菌株CX-7的筛选及其应用试验研究

被引量 : 15次 | 上传用户:h123456p
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
该研究从8个省份的不同类型土壤分离到297株芽孢杆菌,从中筛选到一株解磷、解钾特异菌株,对其解磷解钾效应、抑菌物质的分离、发酵条件及其试验应用效果进行了评价,主要研究成果如下:一、多功效芽孢杆菌的分离和筛选从全国8个省份分离到297株芽孢杆菌,其中89株具有解磷解钾活性,从中筛选解磷解钾强度高的菌株。1、解磷解钾活性定量分析通过液体摇瓶解磷解钾试验,测定89株菌株培养液中水溶性磷和水溶性钾的含量,以胶冻样类芽孢杆菌K-7(ACCC10013)为参比菌株,遴选出解磷解钾活性较高的BY-3、BY-4、CX-7、CX-14、NX-42、NX-43和SS-12菌株,其中CX-7菌株对磷酸三钙和钾长石的分解能力分别为K-7菌株的1.84和2.53倍。2、病原微生物拮抗试验采用平板对峙法测定BY-3、BY-4、CX-7、CX-14、NX-42、NX-43和SS-12菌株及其培养液对小麦、棉花等病原微生物的拮抗作用试验,证实各菌株均具有拮抗的功效,其中CX-7菌株抗菌谱较广,对棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)、棉花立枯病菌(Rhizoctonia solani)、小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、小麦根腐病菌(Fusarium culmorum)和棉花枯萎病菌(Fusarium oxysporum)均有抑菌活性,抑菌圈直径分别为17.3mm、18.3mm、16.7mm、20.1mm和16.9mm。3、盆栽试验通过玉米盆栽,研究了BY-3、BY-4、CX-7、CX-14、NX-42、NX-43和SS-12菌株对玉米的促生长作用,结果表明接种CX-7菌株的玉米株高较对照增加7.8%,叶面积增加18.0%,采用3414统计软件进行生物统计,均达到极显著性差异水平,与其他菌株比较达显著性差异水平。二、CX-7菌株的鉴定及代谢产物分析1、CX-7菌株的鉴定通过对CX-7菌株进行菌体、芽孢形态和菌落形态观察,进行相关生理生化反应测定,并结合16S rDNA序列测定、同源性比和建立系统发育树,依据伯杰氏细菌学鉴定手册,鉴定CX-7菌株为克里不所类芽孢杆菌(Paenibacillus kribbensis)。2、CX-7菌株的代谢产物分析通过高效液相色谱仪测定CX-7菌株发酵液含有四种有机酸含量分别为4.57mg/L,12.63mg/L,10.48mg/L和10.12mg/L;采用乙醇沉淀测定其培养液中多糖含量达到8.5mg/L。通过硫酸铵沉淀法得到CX-7菌株的抗菌蛋白类物质,该蛋白对棉花枯萎病病原微生物具有拮抗作用,该蛋白最适作用pH值7.0,温度25℃,Mg2+和Mn2+具有激活作用,Cu2+、Zn2+和Na+具有抑制作用。经DEAE-Sephadex离子交换树脂分离纯化,并经SDS-PAGE检测该蛋白的分子量约为50KDa,三、CX-7菌株发酵条件研究1、最佳产芽孢条件研究采用单因子和正交试验方法,通过测定培养液中芽孢形成率,确定了CX-7菌株的最佳培养基配比为淀粉5%,豆饼粉1.5%,MgSO40.07%,NaCl0.05%;最佳培养条件为摇瓶种子种龄20h,接种量4%,培养基初始pH8.0,装量100mL/250mL。2、20m3发酵试验利用20m3发酵罐进行CX-7菌株发酵试验,经多次试验证实,采用克氏瓶种子接种发酵周期在36h左右,芽孢生物量达到8.9×108cfu/mL;最佳通风比1:0.8-1.0,接种量8%,培养温度32-34℃。3、CX-7菌株发酵液后处理工艺研究CX-7菌株发酵液离心浓缩工艺为,流量0.5T/h,浓缩倍率8倍,收率95%。采用旋转闪蒸干燥器进行干燥,工艺参数为入口温度135℃、出口温度50-60℃,进料速率80kg/h,在此条件下得到CX-7菌株菌粉,含菌量为2.89×1010cfu/g,含水量≤5%。四、CX-7菌株应用效果研究1、CX-7菌株对土壤酶活性及磷钾养分的影响通过玉米盆栽试验,测定了不同生长期根际土土壤酶活力、速效磷及速效钾含量。结果证实玉米接种CX-7芽孢杆菌,到五叶期土壤各种酶活性均高于对照,其中蔗糖酶活性增加5.27mg/g·24h(四叶期);过氧化氢酶活性增加0.47(0.1moL/LK2MnO4)mL/g;磷酸酶活性增加0.29PhOH mg/g;脲酶活性增加0.18NH3-N mg/g;速效钾含量提高20.0%;速效磷含量提高57.4%。因此接种该菌株可改善玉米根际土壤的生态环境。2、CX-7菌株制剂的大田应用试验采用简单对比试验进行烟草接种试验,结果表明,亩基施CX-7菌株制剂(50亿/克)0.5kg,能促进烟株生长发育,提高烟叶产量、上等烟叶率和中上等烟叶率,提高烟叶等级,同时底施该肥料制剂,可减少一半的基肥施用,增加烟农的收益。采用拌种方法进行小麦小区试验,亩施用CX-7菌株制剂(50亿/克)0.1kg,可促进小麦的生长发育,提高小麦产量。
其他文献
广东郁南同乐大山自然保护区位于广东省云浮市郁南县的东北部,地处北纬22°57’48"至23°9’45",东经111°37’10"至111°43’12",总面积7453hm2。区内最高海拔814m,属丘陵低
朱顶红又名百枝莲、朱顶兰,石蒜科多年生球根花卉。其叶似君子兰,厚而光亮,花大色艳,对开,花梗挺拔,是一种既可观花又可赏叶的植物。一般家庭莳养此花,每年只开一次。笔者通过实验,掌
【正】作业是教学工作中的一个重要环节,是衡量教师教学效果的有效手段,是学生巩固知识、提高能力、收获成功的平台,作业的重要性不言而喻.当前,初中数学教师布置作业的形式
提出了一种镗削过程中基于MATLAB的切削力仿真预测方法,并开发了一种切削力仿真软件。通过建立镗削加工过程的基本参数,研究了刀具几何参数和加工工艺参数与切削面积和线长的
目的比较阿立哌唑与利培酮对女性精神分裂症患者生活质量的影响。方法对60例女性精神分裂症患者随机分为阿立哌唑组和利培酮组,进行3个月的临床研究,采用阳性与阴性症状量表(
分析有限转角力矩电动机主要技术参数间的相互关系,研究解决参数间相互制约的技术措施;在关键技术方案设计、特殊加工工艺等方面进行研究,解决了影响电机性能的诸多问题。研究对
为了能及时准确的发现采煤机电机故障,快速做出电机故障诊断决策,减小损失,针对采煤机电动机中常见的滚动轴承故障,在对采煤机机械故障信号进行深入分析的基础上,提出一种基
本文利用旋转电极上的循环伏安溶出法研究和测定光亮镀镍添加剂的整平能力.在影响测定的诸因素中,旋转圆盘电极的转速和电位扫描速度对测定结果影响显著.研究了在整平剂存在
随着我国新课程改革的不断推进和完善,英语写作教学越来越得到重视。模因论是基于达尔文进化论的观点解释文化进化规律的新兴理论,给英语写作教学带来诸多启发。英语写作水平
本文从哲学、心理学、管理学、系统论等角度,通过运用事实论证、理论论证、比较论证、道理论证等方法,对家纺行业及家纺设计师进行多方面的分析及解构,从分级管理、教育系统以及