【摘 要】
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相较于多糖,寡糖的生物学活性与之不相上下,而寡糖的物理化学性质使其更易于应用和开发,因此近年来人们不断地投入资源和精力来研究寡糖物质,为了发掘出其更多的新的生物学活性,并最终应用于市场.卡拉胶寡糖是海洋红藻中所获得的寡糖物质,目前已经证明具有抗肿瘤、抗动物病毒等免疫活性,我们前期实验发现其对烟草花叶病毒病具有一定的防治效果,为了探究其机制我们进行了以下研究:1.本实验运用菌种Bacillus sp
【基金项目】
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海洋公益性行业可研专项项目“海藻寡糖设施蔬菜抗病诱导剂开发（201505026-4）”；
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相较于多糖,寡糖的生物学活性与之不相上下,而寡糖的物理化学性质使其更易于应用和开发,因此近年来人们不断地投入资源和精力来研究寡糖物质,为了发掘出其更多的新的生物学活性,并最终应用于市场.卡拉胶寡糖是海洋红藻中所获得的寡糖物质,目前已经证明具有抗肿瘤、抗动物病毒等免疫活性,我们前期实验发现其对烟草花叶病毒病具有一定的防治效果,为了探究其机制我们进行了以下研究:1.本实验运用菌种Bacillus sp.Car19进行发酵,从发酵液中提取卡拉胶酶,利用获得的卡拉胶酶降解卡拉胶,对降解产物进行薄层层析,最终得到卡拉胶二糖占85.0%的卡拉胶寡糖,用于后续实验;2.选用去离子水和壳寡糖分别作为阴性对照和阳性对照,参考文献设置不同浓度梯度的寡糖实验组,随后处理烟草后接种TMV,进行统计计算,结果显示卡拉胶寡糖和壳寡糖处理后的烟草相较于对照组发病时间推迟,病情指数降低,对烟草花叶病的防治效果显著提高;3.采用Elisa法对烟草的防御酶活性进行检测,结果显示β-1,3葡聚糖酶、SOD（超氧化物歧化酶）、POD（过氧化物酶）的活性在烟草接种TMV后的不同时间点与对照组相比有显著性的变化;4.采用Real-time PCR对烟草抗性相关通路的关键基因的表达情况进行检测,结果发现在接种TMV后实验组Nr CN、MAPK等基因的表达量相较于对照组提高;5.通过测序结果可以看出,卡拉胶寡糖处理过的烟草在接种TMV后众多基因、多个通路的代谢调控均发生了显著性的差异变化,基因表达差异分析显示有879个基因相较于对照组上调表达,有664个基因表达下调,进一步通过对这些差异基因的GO功能富集发现,这些基因主要参与代谢过程、细胞转化、催化过程,KEGG富集分析结果显示这些差异基因出现在光合作用、角质蜡质合成相关通路上.
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