【摘 要】
：
目的:探究滑膜炎组织中的炎症微环境是否可以激活JAK2/STAT3信号通路,以及是否可以调控Sirtuin1的表达,并进一步揭示滑膜细胞焦亡的机制。方法:1、通过常规病理染色观察患者滑膜组织的病理结构,免疫荧光以及实时定量PCR观察滑膜组织中性粒细胞和巨噬细胞的招募以及多种炎症因子IL-1β,IL-6,TNF-α,IL-4的m RNA水平,了解炎症滑膜组织的炎性变化。2、通过炎症滑膜组织的WB试验
论文部分内容阅读
目的:探究滑膜炎组织中的炎症微环境是否可以激活JAK2/STAT3信号通路,以及是否可以调控Sirtuin1的表达,并进一步揭示滑膜细胞焦亡的机制。方法:1、通过常规病理染色观察患者滑膜组织的病理结构,免疫荧光以及实时定量PCR观察滑膜组织中性粒细胞和巨噬细胞的招募以及多种炎症因子IL-1β,IL-6,TNF-α,IL-4的m RNA水平,了解炎症滑膜组织的炎性变化。2、通过炎症滑膜组织的WB试验观察JAK2/STAT3信号通路相关蛋白,如JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3等蛋白表达,p-JNK信号通路相关蛋白,如P38、p-P65、p-JNK等蛋白表达水平;提取滑膜组织中的原代滑膜细胞通过WB试验进行JAK2/STAT3信号通路、Sirtuin1信号通路活化的验证和ki67蛋白活化,了解炎症滑膜组织及炎症原代滑膜细胞中JAK/STAT通路和Sirtuin1通路激活状态。3、通过MH7A细胞模拟构建滑膜炎的炎症微环境,将JAK2抑制剂AG490对炎症滑膜细胞进行JAK2抑制后,通过CCK8测定细胞活力;通过WB试验观察TNF-α、ki67、Sirtuin1、p-STAT3、p-JAK2、JAK2蛋白表达水平。4、对MH7A细胞进行EX527抑制后,通过CCK8测定细胞活力;通过WB试验观察TNF-α、ki67、Sirtuin1、p-STAT3、p-JAK2、JAK2蛋白表达水平、Bax和Bcl-2蛋白表达水平;通过实时定量PCR实验探究细胞焦亡特征因子IL-18和IL-1β的m RNA水平变化;western blot实验探究细胞焦亡特征蛋白caspase1/4/5,Gastdermin和NLRP3的水平变化。结果:1、炎症滑膜组织结构紊乱,滑膜组织出现病理炎症灶,并出现空泡样变化;IL-1β、IL-6、IL-4和TNF-α等炎症因子m RNA表达水平明显升高;中性粒细胞与巨噬细胞在炎症滑膜中招募并出现聚集的特性,形成显著的炎症灶。2、炎症滑膜组织中JAK2/STAT3信号通路明显被激活;P38、p-P65、p-JK通路明显被激活;在炎症滑膜组织的原代滑膜细胞中,JAK2/STAT3信号通路被激活,同时Sirtuin1信号通路也被激活。3、JAK2被抑制后,滑膜细胞活力显著下降;STAT3表达下降,Sirtuin1与ki67也被下调。4、Sirtuin1被抑制后,滑膜细胞活力显著下降;ki67表达下降,但是JAK2/STAT3信号通路没有受到显著影响;抑制细胞凋亡的Bcl-2表达减低,而促进细胞凋亡的Bax表达却升高;IL-1β和IL-18的m RNA表达水平显著升高;参与滑膜细胞焦亡的信号通路蛋白表达水平显著升高。结论:RA滑膜组织中存在炎性变化;炎症滑膜组织及炎症原代滑膜细胞中JAK2/STAT3通路和Sirtuin1通路被激活;阻断JAK2/STAT3信号通路后,滑膜细胞活力及Sirtuin1信号通路被抑制;Sirtuin1信号通路被抑制后,滑膜细胞活力下降,同时参与滑膜细胞焦亡的信号通路蛋白表达量增加。
其他文献
目的:结合生物信息学技术,应用高通量测序在小鼠脾脏中筛选影响脓毒症预后的关键差异基因。方法:1.将小鼠随机分为对照组和脓毒症模型组,通过腹腔注射不同剂量脂多糖（LPS,Lipopolysaccharide）建立不同预后的小鼠脓毒症模型,根据7天存活率实验,筛选出脓毒症生存组、死亡组的最佳造模剂量。2.采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测对照组、脓毒症生存组、脓毒症死亡组小鼠外周血浆外周血浆中炎症因
目的:本研究旨在通过数据非依赖性采集（DIA）和酶联免疫吸附试验（ELISAs）筛选脓毒症患者血浆中的差异表达蛋白（DEPs）,为判断脓毒症病情提供方便、准确的血清标志物。方法:本项研究纳入了自2019年01月01日开始至2020年12月31日这两年期间于西南医科大学附属急诊医学部住院并明确诊断为脓毒症的患者53例,以及同时期的健康对照组16例;根据28天的转归情况,将脓毒症患者再分为生存组和死亡
目的:了解泸州市社区成年居民豆类食物摄入情况及HUA的流行现状和影响因素,分析泸州市社区成年居民豆类食物摄入与HUA的关系,为HUA患者的膳食指导提供科学依据。方法:按照多阶段分层随机抽样方法,于2020年11月至2021年6月在泸州市的三区四县,采用食物频率法问卷,通过面对面调查泸州市社区成年居民豆类食物摄入情况,并利用四川省基本公共卫生服务数据库,收集体格检查和生化检查指标。运用SPSS.25
为研究温度变化与炭黑填充对橡胶循环拉伸力学行为的影响,利用非接触式自动网格法测试系统,对一系列不同不同炭黑含量的填充橡胶在不同温度下开展了"台阶式"加卸载力学实验。定量归纳和分析结果表明,在所有的循环段,炭黑填料对橡胶基体的增强效应都随着温度升高而减弱,且温度越高这种减弱的趋势越平缓。炭黑含量越高,橡胶材料在各个加卸载循环下的迟滞损耗现象越突出,同时这种迟滞损耗随炭黑含量递增的趋势也随温度升高而减
目的:检测非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）癌组织中SIRT6、CD4+、CD8+、Foxp3+、CD1a+、CD83+的表达情况,研究SIRT6的表达水平与肿瘤免疫微环境中肿瘤浸润性淋巴细胞（Tumor-infiltrating Lymphocytes,TIL）、肿瘤浸润性树突状细胞（Tumor Infiltrating Dendritic Cell
目的:肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）的恶性程度高、病死率高,给社会带来了极大的负担。多项研究表明,基因的异常表达或突变、信号通路的异常激活或抑制、表观遗传修饰的改变等与HCC的发生发展密切相关。本文旨在通过生信分析和基础实验,筛选和鉴定与HCC预后相关的枢纽基因,并探索目标基因THRSP影响HCC进展的潜在分子机制。方法:（1）基于GEO和TCGA数据库,使用
目的:检测系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者的血清肿瘤坏死因子样配体1A（tumor necrosis factor-like ligand 1A,TL1A）表达水平,分析其与SLE疾病活动和临床指标的相关性;同时探讨TL1A对狼疮模型鼠疾病病理的影响,如肾脏组织病理损伤、炎症因子表达变化。本研究的完成将揭示TL1A与SLE发病的关联,为今后以T
目的:探讨EIF4A3/MMP11对结直肠癌侵袭、迁移和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）的影响。方法:通过生物信息学预测MMP11在结直肠癌中的表达水平及MMP11 m RNA能和EIF4A3蛋白结合的可能性。从成都医学院第二附属医院核工业四一六医院获取结直肠癌患者癌及癌旁组织样本各20例,q RT-PCR检测组织中MMP11的表达情况。q
目的:对于高脱位DDH行全髋关节置换紧贴小粗隆截骨中,使用组配式S-ROM假体及一体式Wagner Cone假体的临床效果对比目前尚不清楚。此研究是探讨紧贴小粗隆截骨配合组配式假体或一体式假体治疗Crowe III-IV型DDH患者后的临床效果。方法:设立相应纳入排除标准,回顾性分析2015年9月-2019年8月我科满足纳入排除标准36例Crowe III-IV型DDH患者的临床资料,男5例,女3
目的:空气污染是重要的、全球性的公共威胁。细颗粒物(fine particulate matter,PM2.5)作为首要污染物的大气环境问题十分严峻,严重危害人类健康,其中最为直接的是呼吸系统损伤。上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）不仅参与器官纤维化,还与肿瘤的侵袭转移相关。自噬是通过将受损细胞器和蛋白降解,用以维持细胞内平衡的方式,对疾病有