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铁皮石斛(Dendrobium officinale)是石斛中的极品。本实验以铁皮石斛为原料,通过响应面分析法优化铁皮石斛多糖闪式提取工艺,并分别采用闪式提取、超声辅助提取、传统热提、闪式辅助提取法得到4种不同提取方式下的铁皮石斛多糖。经除杂分离纯化后得到4种铁皮石斛多糖较均一组分,通过一系列理化检验、特征分析、抗氧化活性指标的测定比较、降血糖活性比较,探究闪式提取处理对铁皮石斛多糖性质特征、功能活性的影响。主要结果如下:1.试验选取浸泡时间、闪式提取时间、闪式提取转速三个因素,以响应面分析法优化提取工艺。经响应面实验及拟合优化得最佳工艺条件:浸泡时间19 h,闪提时间184 s,闪提转速4600 r/min。此条件下铁皮石斛多糖提取率为30.77%±0.04,与模型预测值相对误差为0.13%。以优化后的条件闪式提取铁皮石斛多糖,并分别通过超声辅助提取法、传统热提法、闪式辅助提取法获得4种不同提取方式的铁皮石斛多糖。2.试验将4种不同提取方式的铁皮石斛粗多糖,通过木瓜蛋白酶去蛋白、活性炭法脱色、透析去小分子杂质后,经DEAE-52纤维素柱分离出4个不同的组分,并分别将含量最多的纯水洗脱组分编号、收集、浓缩。最后分别用Sephadex G-100柱纯化,洗脱曲线呈单一对称峰,表明上述一系列处理所得铁皮石斛多糖,其组分较单一、相对分子质量分布较为集中、均一性较好。分别将该部分洗脱峰编号、收集、浓缩、透析、冻干,得到较纯较均一的多糖组分DOP-A(闪式提取)、DOP-B(超声辅助)、DOP-C(传统热提)和DOP-D(闪式辅助)。3.试验将4种不同提取方式的铁皮石斛纯多糖DOP-A、DOP-B、DOP-C、DOP-D进行理化性质检测、特征初探。经Molisch反应鉴定4种石斛多糖均有糖类的存在;经斐林试剂判别4种石斛多糖均无可溶性还原糖;经碘-碘化钾溶液鉴定4种石斛多糖均不存在淀粉;经双缩脲试剂、茚三酮溶液鉴定4种石斛多糖均不含蛋白质。经冻融试验鉴定离心无沉淀。比较了不同提取方式的4种铁皮石斛纯多糖的红外光谱分析结果,结果表明4种铁皮石斛多糖红外扫描波型趋势相似、特征吸收峰相近,但部分官能团的透过率和伸缩振动情况存在明显差异。4.试验对4种不同提取方式下铁皮石斛纯多糖的体外抗氧化性活性、体外降血糖活性进行初步比较。比较7项抗氧化指标可知,闪式提取处理可提高铁皮石斛多糖的抗氧化活性,且并未测得闪式处理对多糖的某一抗氧化指标有明显抑制作用。比较2项降血糖指标可知,闪式提取处理可提高铁皮石斛多糖的降血糖活性,且并未测得闪式处理对多糖的某一降血糖活性有明显抑制作用。