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目的:探讨洛铂联合紫杉醇对人胃癌SGC-7901细胞的作用机制,并研究卵巢癌组织中AKAP95、cyclinE1、cyclinD1、Cx43蛋白的表达及与临床病理学指标的关系。方法:1、MTT实验分别检测洛铂、紫杉醇及两者联合作用于胃癌SGC-7901细胞系的抗肿瘤效应。2、运用流式细胞术检测洛铂、紫杉醇及两者联合应用对胃癌SGC-7901细胞的细胞周期分布影响。3、运用western blot方法检测洛铂、紫杉醇作用SGC-7901细胞后,cyclinD1/E1/B1及CDK2/4、Rb、pRb蛋白表达的变化。4、采用免疫组织化学方法检测54例卵巢癌组织中蛋白的表达。5、利用分子克隆技术构建cyclinE2过表达及沉默质粒。6、利用western blot和免疫荧光实验方法检测cyclinE2和LMW-cyclinE2的定位,并检测两种抗体对CCNE2编码的蛋白的特异性。7、利用Co-IP、银染、MS/MS方法鉴定cyclinE2(A-9)抗体对应蛋白是否为CCNE2基因编码的蛋白。结果:1、洛铂联合紫杉醇对胃癌SGC-7901具有协同作用联合指数CI<1。2、联合使用洛铂和紫杉醇能增加SGC-7901细胞中cylinE1和CDK2的表达(P<0.05),减少cylinB1、Rb、pRb的表达(P<0.05),cyclinD1和CDK4表达变化无统计学意义(P<0.05);联合使用可以导致细胞S期和M期阻滞。3、AKAP95、cyclinD1、cyclinE1蛋白在卵巢癌组织中表达的阳性率分别为72.22%、66.67%和79.63%,高于癌旁组织的33.33%、25.00%和8.30%;Cx43蛋白在卵巢癌组织的阳性率为40.74%,低于癌旁组织的75.00%,其差异均有统计学意义(P<0.05)。4、在卵巢癌组织中,cyclinD1蛋白的表达与组织类型有关(P<0.05),与分化程度无关(P>0.05),AKAP95、cyclinD1、cyclinE1蛋白的表达与分化程度、组织类型均无关(P>0.05)。5、AKAP95、cyclinE1和Cx43蛋白三者之间的表达均有关联性(P<0.05),cyclinD1、cyclinE1和Cx43蛋白三者之间互有关联性(P<0.05),而AKAP95与cyclinD1蛋白之间未见关联性(P>0.05)。6、cyclinE2主要定位于细胞浆,核内少量表达,而LMW-cyclinE2主要定位于细胞核。7、cyclinE2对CCNE2编码的蛋白没有特异性,而LMW-cyclinE2对CCNE2编码的蛋白有特异性。8、cyclinE2(A-9)抗体对应的蛋白没有检测到CCNE2基因编码的氨基酸序列。结论:1、洛铂联合紫杉醇对胃癌SGC7901的细胞周期阻滞具有协同作用。2、AKAP95、cyclinD1和cyclinE1蛋白可能具有促进卵巢癌发生发生发展的作用,Cx43具有抑制卵巢癌发生发展的作用。3、cyclinE2(A-9)抗体识别未知蛋白,此蛋白可能不是LMW-cyclinE2,cyclinE2(40890)抗体识别的是cyclinE2蛋白。