化学农药在防治农业有害生物方面的应用效果显著，但是由于化学农药的过量使用，环境问题也随之产生。生物农药以其独显的高效低毒的特点，将在农业病虫害防治中得到越来越广泛的应用。苏云金芽孢杆菌制剂是目前研究最为深入，应用最为广泛的生物农药。其产物的结晶伴胞晶体蛋白对磷翅目、半翅目昆虫具有特异的毒杀效果。挖掘我国丰富的Bt资源，筛选出更多具有杀虫活性的Bt菌,分离克隆其编码杀虫蛋白的基因，对构建Bt工程菌，培育转Bt的抗虫植物具有深远的意义。松材线虫是一种林业有害生物，对松树具有毁灭性的危害，它通过松墨天牛进行传播，松树一旦感染上松材线虫，将在很短的时间内死亡。目前，对松材线虫的防治主要是针对其媒介昆虫松墨天牛来进行的，主要以化学防治为主，直接针对松材线虫进行防治难度较大，国内外研究的较少。本实验室从环境中分离出80株苏云金芽孢杆菌，初步筛选出8株对松材线虫具有毒杀作用的菌株，进一步提取这8株菌株的伴孢晶体蛋白，对松材线虫进行毒力测定，最后筛选出一株对松材线虫具有最强毒杀活性的菌株，命名为ZJFC85菌株。已经知道对松材线虫具有毒杀活性的是ZJFC85菌株编码产生的伴孢晶体蛋白，为了能为培育出抗松材线虫病的松树树种提供遗产材料，本实验室将克隆出ZJFC85菌株中能编码产生的伴孢晶体蛋白cry基因。通过查阅文献，设计9对cry基因保守区域的引物，以ZJFC85菌株质粒DNA为模板进行PCR扩展，扩增出一段保守区域序列cry1，对cry1基因进行克隆，克隆产物送出测序，测序结果分析该菌株含有cry1Aa基因，设计cry1Aa基因的特异性引物，PCR扩增得到cry1Aa基因的全长基因，对cry1基因的全长基因进行克隆，得到我们需要的遗产材料。