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目的:以结直肠癌细胞为研究对象,检测UBC9在结直肠癌细胞中的表达,探讨UBC9对结直肠癌细胞侵袭与转移的影响。通过转染UBC9 shRNA干扰载体和UBC9过表达载体,研究UBC9作用于结直肠癌细胞侵袭、迁移的分子机制,为结直肠癌的治疗提供新的治疗靶标。方法:Western Blot及Real time QPCR检测结直肠癌细胞株:SW480、DLD-1、HCT116、LOVO以及结肠上皮细胞NCM460中UBC9的蛋白及mRNA表达水平。选择相对正常结肠上皮细胞UBC9表达更高结直肠癌细胞转染UBC9-shRNA,细胞转染后检测UBC9的蛋白及mRNA的表达水平;细胞侵袭与迁移实验和细胞划痕愈合实验检测细胞迁移与侵袭;Western Blot检测MMP2、MMP9蛋白的表达的变化。然后在结直肠癌细胞转染UBC9-shRNA、UBC9过表达载体,Western Blot检测EMT相关蛋白Vimentin、Snail1、E-cadherin的表达变化;检测Wnt/β-catenin通路关键蛋白β-catenin、GSK3β、TCF4、p-GSK3β的表达。结果:人结直肠癌细胞株SW480、DLD-1、HCT116、LOVO中UBC9的蛋白和mRNA相对人结肠上皮细胞NCM460明显过表达(P<0.01),而结直肠癌细胞中SW480和HC116表达最高,所以我们选择这两株细胞进行以下实验。转染UBC9 shRNA干扰载体,干扰UBC9表达;rt-qPCR及Western Blot结果显示,shUBC9a能够有效干扰UBC9 mRNA及蛋白的表达水平(P<0.01)。划痕愈合实验和Transwell实验发现,相比较于空载组,下调UBC9的表达能够抑制结直肠癌细胞株SW480、HCT116划痕愈合速度、迁移与侵袭的能力(P<0.01),空载组与正常组无差(P>0.05)。Western Blot检测到MMP2、MMP9蛋白表达受到抑制(P<0.01)。相对于空载组,下调UBC9抑制SW480、HCT116细胞的Snail1、Vimentin表达,E-cadherin表达上调(P<0.01);上调UBC9促进SW480、HCT116细胞的Snail1、Vimentin表达,E-cadherin表达受到抑制(P<0.01)。正常组与空载组表达无差异(p>0.05)。相对于空载组,下调UBC9抑制SW480、HCT116细胞的β-catenin、TCF4表达抑制,p-GSKβ表达上调(P<0.01);上调UBC9促进SW480、HCT116细胞的β-catenin、TCF4表达上调,p-GSKβ表达抑制(P<0.01);各组别GSKβ表达无变化(p>0.05),正常组与空载组蛋白表达无差异(p>0.05)。结论:通过抑制结直肠癌细胞UBC9的表达,可抑制其侵袭与迁移,抑制其上皮间质转化,同时抑制Wnt/β-catenin信号通路的传导。UBC9可能通过Wnt/β-catenin通路,促进结直肠癌细胞侵袭、转移和上皮间质转化。