论文部分内容阅读
随着蛋鸡养殖业的不断发展,蛋鸡的健康问题越来越受到关注,蛋鸡机体健康状态良好可以保证生产性能和蛋品质。在蛋鸡日粮中添加天然无公害的植物或者植物提取物也成为了当下热门研究。铁皮石斛具有十分重要的药理作用,入药的都是其茎部。铁皮石斛叶是铁皮石斛的副产物,由于铁皮石斛叶的化学组成与铁皮石斛茎十分相似,目前关于铁皮石斛叶的药理作用的研究也逐渐增多。目前已有大量研究表明铁皮石斛叶具有可以改善机体免疫性能、抗菌能力、抗炎能力和保护消化系统等药理作用,这些研究大多是针对小鼠的,在蛋鸡等家畜上的研究较少。本试验旨在探究蛋鸡日粮中添加铁皮石斛叶干粉对蛋鸡生产性能、蛋品质、血清生化水平、免疫性能、肠道健康和腿骨健康的影响。1.铁皮石斛叶干粉对蛋鸡生产性能的影响本试验旨在探究铁皮石斛叶对蛋鸡的生产性能、蛋品质和血清生化指标的影响。选用健康的19周龄京红一号蛋鸡240只,随机分为3个处理组,分别为:对照组、1200 mg/kg铁皮石斛叶组、3600 mg/kg铁皮石斛叶组,采用单因素试验设计,试验期16周。结果表明:与对照组相比,3600 mg/kg铁皮石斛叶能够显著降低31-34周龄蛋鸡的日平均采食量、27-34周龄鸡蛋破损率,显著增加19-22周龄的蛋黄颜色及血清球蛋白水平;1200 mg/kg铁皮石斛叶能够显著降低31-34周龄蛋鸡的日平均采食量、31-34周龄的鸡蛋破损率,显著提升27-30周龄蛋黄颜色和蛋黄比例、31-34周龄的哈氏单位和血清总蛋白水平。结果显示,铁皮石斛叶干粉不影响蛋鸡产蛋性能,但可以改善蛋品质。2.铁皮石斛叶干粉对蛋鸡免疫性能、盲肠菌群、短链脂肪酸、肠道屏障和炎症的影响本试验旨在研究日粮中添加铁皮石斛叶干粉对蛋鸡免疫性能、盲肠菌群多样性、盲肠内容物短链脂肪酸含量、十二指肠肠道屏障和肠道炎症相关基因表达的影响。在每组中随机挑选8只蛋鸡,取其盲肠内容物和十二指肠肠组织,通过16Sr RNA测序测量盲肠菌群结构;提取十二指肠RNA,测定肠道屏障和炎症因子相关基因m RNA表达量。结果显示:3600 mg/kg铁皮石斛叶组脾脏指数、血清总蛋白、血清球蛋白和血清IgG含量显著高于对照组;1200 mg/kg和3600 mg/kg铁皮石斛叶组脱硫菌门（Desulfobacterota）相对丰度极显著低于对照组;与对照组相比,1200 mg/kg和3600 mg/kg铁皮石斛叶组拟杆菌属（Bacteroidales）相对丰度显著增高,脱硫菌属（Desulfovibrio）、梅尔海拉菌属（Mailhella）和α-变形菌（Alphaproteobacteria）相对丰度显著减少;3600mg/kg铁皮石斛叶组十二指肠闭锁蛋白（Occludin）、钙黏蛋白（Cadherin）、紧密连接蛋白-1（Claudin-1）、紧密连接蛋白-3（Claudin-3）、紧密连接蛋白-5（Claudin-5）、闭合小环蛋白-1（ZO-1）、闭合小环蛋白-2（ZO-2）、闭合小环蛋白-3（ZO-3）基因的m RNA表达量较对照组显著上调;1200 mg/kg铁皮石斛叶组十二指肠Occludin、Claudin-3、ZO-3基因的m RNA表达量较对照组显著上调;1200 mg/kg和3600 mg/kg铁皮石斛叶组十二指肠白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-2α（IL-2α）、TOLL样受体-2（TLR2）、干扰素-γ（IFN-γ）、转化生长因子-β3（TGF-β3）、抗肿瘤坏死因子-α（TNF-α）基因的m RNA表达量较对照组显著下调。结果表明,在日粮中添加铁皮石斛叶干粉能增加盲肠菌群多样性,降低产硫菌和条件致病菌α-变形菌的丰度,提高免疫力,并促进肠道屏障功能,降低肠道炎症。3.铁皮石斛叶干粉对蛋鸡腿骨健康的影响本试验旨在研究日粮中添加铁皮石斛叶干粉对京红1号蛋鸡腿骨健康和骨代谢相关基因表达量的影响。每组随机挑选8只蛋鸡,取完整的右腿胫骨和股骨,并取其左腿股骨骨干的骨组织,测量股骨和胫骨的骨形态学指标、骨密度指标和骨强度指标;提取骨干RNA,测定骨代谢及细胞因子相关基因表达量。结果显示:铁皮石斛叶对蛋鸡腿骨（胫骨和股骨）骨强度、骨密度等骨健康指标没有显著影响;但是显著上调股骨组织中骨生成相关基因,包括血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor A,VEGFA）、骨保护素（osteoprotegerin,OPG）、基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）、基质金属蛋白酶诱导因子（CD147）、RUNX2、骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic protein 2,BMP2）、的表达量;能显著上调骨吸收相关基因,包括组织蛋白酶K（cathepsin K,CTSK）和核因子κB受体活化因子配体（RANKL）。铁皮石斛叶还可以上调对骨形成有促进作用的细胞因子,包括白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素10（IL-10）、生长转化银子β3（TGF-β3）和生长转化因子β4（TGF-β4）及骨吸收有促进作用的细胞因子白细胞介素6（IL-6）和抗肿瘤坏死因子α（TNF-α）的m RNA表达量。综上所述,铁皮石斛叶可以在分子层面同时促进蛋鸡骨形成和骨吸收,提高骨代谢水平,对骨密度和骨强度无显著影响。综上所述,在蛋鸡日粮中添加铁皮石斛叶干粉,虽然对蛋鸡产蛋性能没有显著影响,但是可以改善蛋鸡蛋品质和免疫性能;降低蛋破损率和肠道中产硫菌和条件致病菌的相对丰度及炎症因子基因表达量;增加肠道中有益菌的相对丰度和肠道屏障功能相关基因m RNA表达量;铁皮石斛叶能够促进蛋鸡腿骨骨吸收作用,但对蛋鸡腿骨骨密度、骨强度指标没有显著作用。本试验对铁皮石斛叶在畜禽肠道健康上的应用提供了理论基础。