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目的：(1)观察人舌癌Tca8113细胞系与顺铂诱导的舌癌耐药细胞系Tca/DDP中VEGF(vascular endothelial growth factor, VEGF) mRNA和蛋白表达情况。(2)将本小组前期实验构建的靶向VEGF基因的shRNA真核表达载体质粒,转染体外培养的Tca/DDP细胞,研究靶向VEGF基因的shRNA真核表达载体质粒对VEGF的抑制效果及Tca/DDP细胞生长的影响。方法：(1)用噻唑蓝(MTT)法检测Tca/DDP细胞及亲本细胞对不同化疗药物的敏感性,通过细胞免疫化学的方法,检测亲本与耐药细胞间多药耐药蛋白P-gp的表达。(2)用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)、Western Blot法分别检测亲本与耐药细胞系VEGF mRNA和蛋白表达的情况。(3)将已构建的靶向VEGF基因的shRNA真核表达载体质粒,经LipofectamineTM 2000脂质体转染入体外培养的Tca/DDP细胞系,采用RT-PCR、Western Blot法检测质粒对VEGF的干扰效应。(4)用MTT法检测转染对Tca/DDP细胞生长的影响情况。结果：(1)顺铂诱导的舌癌耐药细胞对不同药物的耐受性均有不同程度的提高,且耐药细胞的多药耐药蛋白P-gp表达明显高于亲本细胞。(2)与亲本Tca8113细胞比较,耐药系Tca/DDP细胞VEGF mRNA与蛋白表达水平无明显差异。(3)采用LipofectamineTM 2000进行脂质体介导VEGF基因的shRNA真核表达载体质粒转染Tca/DDP细胞48小时后采用RT-PCR、Western Blot检测,发现转染组细胞中VEGF的表达显著低于空白对照组、阴性对照组及空载体组。(4)用MTT法检测,分别在转染后24h、48h和72h各组细胞的生长抑制情况,显示干扰VEGF的表达对Tca/DDP细胞的生长有明显的抑制作用。结论：(1)提示Tca/DDP细胞具有多药耐药的特性。(2)Tca/DDP与Tca／8113细胞中均存在VEGF的表达,且两者无明显差异。(3)采用pGenesill.1载体构建靶向VEGF基因的shRNA质粒,能有效抑制顺铂诱导的舌癌耐药细胞系Tca/DDP中VEGF在mRNA和蛋白水平上的表达。(4)靶向抑制VEGF表达可以抑制舌癌耐药细胞Tca/DDP的生长,其可以为探讨治疗耐药舌癌提供理论依据。