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载脂蛋白B是富含甘油三酯的脂蛋白(CM、VLDL)和富含胆固醇的脂蛋白(LDL)的重要组成部分，主要参与体内脂蛋白的代谢与运输。载脂蛋白B有两种亚型:ApoB-100和ApoB-48。后者是前者通过RNA编辑产生的截短产物。已经证实，这种产物可以由ApoB RNA上26个碱基的保守序列来确保的CAA到UAA编辑来产生。ApoB-100作为LDL的唯一受体，将体内胆固醇以LDL形式转运至全身各组织。ApoB-48负责饮食来源乳糜微粒的合成与分泌，半衰期极短，能被快速识别并清除。血浆中ApoB-100含量的降低直接导致LDL形式脂蛋白的减少，从而能够降低高胆固醇血症引起动脉粥样硬化等心血管疾病。 本实验室在前期研究中利用该特点在ApoB RNA编辑位点CAA及识别序列的两端，上游和下游区域分别连接一个红色荧光蛋白DsRed与绿色荧光蛋白GFP，构建了瞬时表达的质粒载体。将其导入编辑细胞Caco-2和CBRH-7919中，发现存在多色荧光的表达，提示荧光嵌合载体可以指征RNA编辑。再对经分选后的绿色细胞群体进行培养时，发现细胞的荧光颜色将变为多色荧光。进一步的秋水仙素细胞周期捕获实验，证实颜色转变与细胞周期高度同步，从而提示ApoBRNA编辑与细胞周期有关。 为了进一步研究细胞周期对ApoB RNA编辑的影响，本实验重组荧光嵌合慢病毒表达载体，通过病毒感染编辑细胞系Caco-2和CBRH-7919，获得稳定表达株。在稳定株的基础上，构建特异性针对与细胞周期密切相关的CDK1、CDK2的RNAi慢病毒表达载体，以之转染稳定细胞株，使CDK1、CDK2基因表达沉默。用激光共聚焦显微镜及流式检测方法检测细胞在CDK1、CDK2干扰后不同荧光颜色细胞的比例。结果显示:在共聚焦显微镜下，细胞在干扰CDK1后，细胞出现多核现象，指征ApoB RNA编辑效率的红色或者黄色荧光均出现于多核细胞中，比例较其对照组有明显上升;而在干扰CDK2后带有红色和黄色荧光的细胞较对照组无明显差别。流式细胞仪定量分析的结果也发现细胞在干扰CDK1后，红色和黄色细胞比例较其对照有显著增加(p＜0.01)，而在干扰CDK2后带有红色和黄色荧光的细胞较对照组无显著差别(p＞0.05)。流式与共聚焦检测结果均证实，干扰CDK1后，细胞被阻滞于G2/M后期，细胞周期受到抑制，ApoB的RNA编辑效率增加。为证实编辑在细胞水平上的检测结果，用测序法进一步证实了ApoB RNA编辑在分子水平上的检测结果与细胞水平上一致。这提示，ApoB RNA编辑可能起始于细胞有丝分裂后期。 本实验通过慢病毒构建能均一和稳定的反映ApoB RNA编辑的细胞检测体系，克服了瞬时表达质粒转染的低效率问题，为长期研究ApoB RNA编辑提供了一个新方法。本研究结果首次确证了本实验室前期发现的ApoB RNA编辑与细胞周期调控相关性的问题，提示了编辑起始于细胞有丝分裂后期。为研究ApoBRNA编辑的细胞周期依赖性奠定了坚实的基础。