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背景:慢性低灌注白质损伤,即缺血性白质脑病,在中老年人中普遍存在,而且发生率随年龄增大而增加。当发生大脑慢性低灌注时,极易引起软脑膜动脉的长穿支动脉供血不足,造成缺血改变,导致慢性低灌注白质损伤并可引起神经功能缺失,主要表现包括认知功能损害。腺苷A1受体(adenosine A1 receptors,A1ARs)在慢性低灌注脑白质损伤中的作用机制仍然不是十分清楚。缺血性白质脑病发病机理尚未明确,对于神经活性物质参与以及能量代谢变化过程中的具体生物学机制仍然不清楚。以往研究发现慢性低灌注造成的脑白质损伤,往往伴有白质区域炎性细胞浸润和胶质细胞增生活化,提示脑白质损伤与炎症改变的病理机制有关。A1ARs被证实参与了巨噬细胞炎性因子表达的调控,提示A1ARs可能在缺血性白质脑病中发挥重要作用。 目的:本研究将重点探讨A1ARs在慢性低灌注导致的白质损伤和修复中的作用和机制。 方法:我们采用单侧(右侧)颈总动脉闭塞(right unilateral common carotid artery Occlusion,rUCCAO)方法建造慢性脑缺血模型。利用免疫反应分别检测A1AR,A2aAR,雷帕霉素靶蛋白(mammalian target ofrapamycin, mTOR),磷酸化mTOR(phosphorylation of mTOR, p-mTOR),少突胶质细胞的标志物蛋白质脂蛋白(proteolipid protein, PLP)和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein, MBP)在白质中的表达变化。ElISA检测炎性细胞因子白介素-1β(interleukin-1β, IL-1β),肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和抗炎细胞因子(interleukin-10, IL-10)的表达变化。应用高选择性A1ARs激动剂CCPA探讨脑慢性低灌注白质损伤与修复的生物学机制。此外,Morris水迷宫实验用于检测认知功能障碍。 结果: 1.水迷宫结果显示 rUCCAO组小鼠找寻平台潜伏期时间在4周和6周明显延长。 2.与对照组相比,慢性低灌注(rUCCAO术后)小鼠胼胝体内A1ARs和A2aARs表达水平在2周、4周和6周均显著减少。 3.与假手术小鼠相比,rUCCAO组小鼠IL-10表达水平在6周时明显减少;而IL-1β表达无明显变化。 4.与假手术小鼠相比,rUCCAO组PLP表达水平在2周、4周和6周明显降低。 5. CCPA激动剂治疗组寻找平台潜伏期时间在4周和6周明显减少;CCPA激动剂治疗组穿越目标象限平台次数在2周、4周和6周均有所增加。 6.与安慰剂对照组相比,CCPA激动A1ARs后,mTOR磷酸化水平在2周、4周和6周表达均明显增加。 7.与安慰剂对照组小鼠相比,CCPA激动A1ARs后,MBP在2周、4周和6周表达均明显增加。 8. CCPA激动A1ARs后,IL-10表达在2周、4周和6周表达明显增加;与安慰剂对照组比较发现,6周时,应用 CCPA激动A1ARs组TNF-α表达减少。 结论:慢性低灌注可以导致脑白质损伤时可能导致 A1ARs和A2aARs表达下调;MBP和PLP表达同时减少可能是慢性低灌注脑白质损伤时记忆功能损害的重要因素;激活A1ARs可以介导mTOR信号通路修复慢性低灌注脑白质损伤,激活A1ARs能够上调mTOR的磷酸化表达,促进MBP再生,修复髓鞘蛋白。此外,激活A1ARs,能够活化mTOR,促使IL-10表达水平升高并且抑制TNF-α表达上调,从而进一步发挥神经保护作用。因而, A1ARs可作为修复脑慢性低灌注导致白质炎性损伤的重要靶点.