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目的:
观察足细胞Tbxa2r基因敲低对嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞凋亡的影响。
方法:
通过目标序列的设计以及细胞转染效率评价后,RT-PCR检测干扰效果,Westernblot法检测Tbxa2r蛋白表达,流式细胞仪检测嘌呤霉素氨基核苷诱导的MPC5细胞的凋亡情况。
结果:
1.正常足细胞培养48h后,用嘌呤霉素氨基核苷刺激48h,细胞没有明显的凋亡现象。
2.阴性对照组(加无关siRNA片段),嘌呤霉素氨基核苷刺激后,结果也和正常细胞相仿。
3.阳性对照组(GAPDH干扰质粒),嘌呤霉素氨基核苷刺激后,凋亡细胞明显增加,坏死细胞也大大增加。
4.有效干扰片段组(Tbxa2r-mus-1677),嘌呤霉素氨基核苷刺激后,凋亡和坏死的细胞和阳性对照组相似。
结论:
嘌呤霉素氨基核苷能促进Tbxa2r基因敲低的足细胞发生凋亡和坏死。