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乳酸菌是应用最广泛的益生菌之一,可以拮抗病原微生物,维持肠道屏障功能。B细胞是机体黏膜免疫的重要细胞之一,是肠相关淋巴组织(gut associated lymphocytes tissue,GALT)的重要组成细胞。给乳鼠口服乳酸菌,通过检测对B细胞分化发育的影响,有助于揭示乳酸菌作为肠道正常菌群对B细胞发育和分化的诱导分子机制,从而为阐明乳酸菌与机体免疫系统分化发育机制提供科学数据。具体研究内容及结果如下:本研究将50只1周龄BALB/c小鼠随机分为两组,分别为PBS对照组,鼠李糖乳杆菌(LGG)组,每组25只。应用LGG干预1周龄BALB/c小鼠,口服剂量为10μL(107CFU)/只,隔天灌胃,连续两周,以口服PBS处理小鼠作对照。于干预后第7d、14d、21d、28d和35d不同时间点进行如下指标的检测:(1)流式细胞术(FCM)检测小鼠脾脏(SPL)、肠系膜淋巴结(MLN)、派尔氏结(PPs)、骨髓(BM)小肠固有层(IEL)中的B220+B总B细胞、B220+CD43+IgM-IgD-祖B细胞(pro-B)、B220+CD43-IgM-IgD-前B细胞(pre-B)、B220+CD43-Ig M+IgD-未成熟B细胞(Immature B)和B220+CD43-IgM+IgD+成熟B细胞(Mature B)四个阶段发育情况(2)流式细胞术(FCM)检测小鼠SPL、MLN和PPs中B细胞CD80、CD40和MHC-Ⅱ表达情况,分析B细胞活化和抗原递呈能力(3)ELISA法检测肠道灌洗液中SIgA和血清中IgM、IgA和IgG的含量变化。结果表明:与对照组相比,BM中Pro-B数量在LGG干预第7天显著降低,随着干预停止,Pre-B和Immature-B细胞数量显著增加,随后Mature-B细胞数量显著增加,表明LGG促进BM中Pro-B向Mature-B的发育;LPL中Pro-B细胞的数量在LGG干预第7天显著增加,即促进Pro-B细胞的发育,随着干预的停止,Mature-B细胞数量显著增加,即促进Pro-B向Mature-B细胞发育;PPs中B220+B数量在LGG干预第14天显著增加,Pro-B细胞数量与对照组相比无显著差异,Pre-B细胞数量呈上升趋势,在第14和21天显著增加,第28天显著降低,Immature-B细胞数量在第21天显著增加,第28天显著降低,Mature-B细胞数量在第14天显著降低。同时SPL和MLN中B220+B淋巴细胞数量在LGG干预第7天显著增加,SPL中Mature-B细胞的数量在第7天和35天极显著增加,而MLN中Mature-B细胞数量显著降低。综上说明小鼠口服LGG能够促进Pro-B细胞的发育,促进B淋巴细胞的成熟;同时能够调节B细胞参与的适应性免疫反应,从而防御和抵抗病原微生物的感染。研究LGG组和对照组对B细胞MHC-Ⅱ、CD40、CD80的表达我们发现,LGG干预后,首先抑制B细胞表面MHC-Ⅱ、CD40和CD80的表达量,随着LGG在肠道内定植,上调B细胞表面MHC-Ⅱ、CD40和CD80的表达量,由此表明LGG干预初期抑制B细胞活化和抗原递呈能力,随着LGG在肠道内定植稳定,提高B细胞活化和抗原递呈能力。ELISA检测的结果进一步验证了上述结果,LGG干预下,能够显著提高肠道粘膜SIgA的分泌量;LGG干预初期,LGG组与Control组相比,血清中IgA分泌量减少,而IgG和IgM分泌量升高;随着干预的停止,LGG组血清中IgA和IgM分泌量升高,而IgG分泌量减少。表明LGG干预后调节B细胞分泌免疫球蛋白,从而调节小鼠粘膜免疫和体液免疫,防御和抵抗病原微生物的感染。