早期生长反应基因-1（Egr-1，early growth response gene 1）是一种即早基因，可经多种刺激因素诱导而表达，其翻译产物Egr-1蛋白则是一种转录因子。近年研究表明，多种脏器缺血再灌注后均会诱导Egr-1表达上调。借助于基因敲除技术或反义寡核苷酸技术，研究者认为Egr-1可能是缺血再灌注（ischemia/reperfusion，I/R）损伤的一种共同分子基础，而调节Egr-1表达可能是I/R损伤药物治疗的一种新机制。碘化N-正丁基氟哌啶醇（F₂）是我课题组合成的具有拮抗心肌I/R损伤作用的一个新化合物，其药理机制与其阻断心肌细胞和血管平滑肌细胞膜钙通道，防止钙超载有关，但F₂对I/R所致心肌Egr-1表达变化的影响如何，尚不十分清楚。另外，由于心肌组织内包括多种细胞（如心肌细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、炎症细胞等），F₂的作用究竟与哪种细胞密切相关亦不清楚。由此，本研究拟探讨F₂对缺血再灌注心肌组织Egr-1表达变化的影响，以进一步揭示F₂抗心肌I/R损伤的新机制。另选取I/R损伤受累最严重的心肌细胞作为研究对象，采用原代培养的心肌细胞缺氧复氧（hypoxia/reoxygenation，H/R）模型，观察F₂对H/R所致心肌细胞损伤及Egr-1表达变化的影响，以进一步明确F₂作用的靶细胞。 方法 在体研究：（1）缺血再灌注模型的建立及实验分组：手术结扎大鼠冠状动脉左前降支造成心肌缺血60min后解除结扎再灌注180min。大鼠随机分成五组：假手术（sham）组、I/R组、I/R+溶剂（聚乙二醇400，PEG）组、I/R+F₂（F₂）组和I/R阳性对照药（维拉帕米，Verapamil，VER）组。其中F₂（2mg/kg）、VER（0.4mg/kg）和等容积的PEG分别于手术前5min舌下静脉给予。（2）采用Northern-blot法研究心肌组织中Egr-1 mRNA的表达水平：用随机引物标记法制备³²p标记的Egr-1探针，同时用β-actin作为内对照。提取组织总RNA，经变性凝胶电泳、转膜、杂交后，放射自显影并对图像进行扫描分析。（3）采用免疫组织化学方法，观察分析Egr-1蛋白在心肌组织中的定位表达情况，同时对其进行半定量分析。