目的糖尿病是一组多病因导致的以高血糖为特点的代谢性疾病,糖尿病患病率呈快速上升趋势,现已成为全世界关注的公共卫生问题。2型糖尿病是最常见的一种类型,它的发病除与遗传、环境、生活方式及膳食结构密切相关外,越来越多的研究认为糖尿病及其并发症的发生与氧化应激有关。体内物质代谢反应产生过多的活性氧,引起机体的氧化应激,影响胰岛素的信号传导,造成β细胞功能减退和胰岛素抵抗。本研究拟对糖尿病患者进行膳食调查和生化指标检测,了解其体内营养氧化应激状态。在此基础上采用口服蜂胶进行干预,检测其生化指标、氧化/抗氧化指标和炎症因子水平,进一步探讨蜂胶对糖尿病患者能量代谢和氧化应激的干预作用及其作用机制。方法第一部分2型糖尿病患者膳食调查与生化检查1.针对糖尿病患者的膳食调查问卷的设计与开发,采用定性食物频率法问卷,进行糖尿病患者调查的横断面研究,建立糖尿病患者数据库。2.在问卷中附加生活习惯、膳食习惯及个人基本情况等问题,其中包括性别、年龄、体质指数、最高学历、经济收入等,总结2型糖尿病患者的一般情况和膳食营养素摄取情况。3.比较2型糖尿病患者膳食营养素摄入量与推荐摄入量或适宜摄入量。4.检测2型糖尿病患者生化指标(空腹血糖、糖化血红蛋白、总蛋白、白蛋白、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、尿素氮、肌酐、尿酸),检测谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、血浆铁还原能力、丙二醛。第二部分蜂胶对2型糖尿病患者能量代谢和氧化应激的干预作用及其机制研究1.将符合纳入标准的65名糖尿病患者,按血糖水平随机分为对照组和蜂胶组,蜂胶组服用巴西绿蜂胶胶囊,6粒/日,3次/日,饭后服用,连续服用18周。干预过程中,进行一次膳食调查,通过4次随访了解研究对象服用情况。2.在试验开始、结束时分别对糖尿病患者进行人体测量,包括身高、体重、体质指数(body mass index,BMI),体质指数(BMI)按照体重(kg)/身高(m)2计算,还包括腰围、臀围、腰臀比(waist to hip ratio,WHR),腰臀比(WHR)按照腰围(cm)/臀围(cm)计算。3.在试验开始、结束时分别采血,检测空腹血糖、糖化血红蛋白、胰岛素、醛糖还原酶、脂联素、乳酸脱氢酶、谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、血浆铁还原能力、丙二醛,在实验结束时采血检测总黄酮、总多酚、氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)、羰基、白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factors-α,TNF-α)。结果第一部分2型糖尿病患者膳食调查与生化检查1.本次横断面研究调查了338名年龄为32~90岁(62.1±11.2岁)的2型糖尿病患者,其中男性177名,女性161名,绝大多数(333人,98.5%)为汉族。糖尿病新发病例36名,既往病患302名,糖尿病既往病史约10.1年。71.0%的人为超重或肥胖,75.4%的人没有读过大专/大学及以上学位,44.4%的人家庭月收入少于5,000元。2.男性的能量、蛋白质、脂肪、硫胺素、核黄素、烟酸、磷、钾、镁、锌、硒、锰摄入量相对女性来讲更高,均具有统计学差异(p<0.05)。3.年龄因素对各营养素摄取的影响不大。不溶性纤维、铁、铜、锰的摄入量,50岁以下组的摄入量高于高龄组。4.BMI对营养素摄入量来讲,脂肪、维生素C、维生素E、钙、钾、镁的摄入量,体重偏轻组的摄入量少,而不溶性纤维的摄入量体重偏轻组最多。5.最高学历对营养素摄入量也有影响,大学组与小学及其他组相比较,能量、碳水化合物、不溶性纤维、维生素E、铜、锰的摄入量均高于小学及其他组。6.家庭月收入总和2,000元以下的对象作为对照组,其他组(除中等收入组外)与其相比,在能量、蛋白质、碳水化合物、不溶性纤维、核黄素、烟酸、维生素C、维生素E、钾、镁、锌、铜、锰的摄入量上,均高于低收入组。7.营养素摄入量与RNIs(recommended nutritional intakes)或AIs(adequate intakes)相比较,能量摄入低于RNIs;蛋白摄入与RNIs相当或偏低;钙摄入量严重不足;磷的摄入量远高于标准的700 mg/d;铁的摄入量男性较高;锌的摄入量男性50岁以下组摄入不足;硒的摄入量各年龄组均低于RNIs,特别是60~70岁和70~80岁这两个年龄段。铜的摄入量除70~80岁组略低外,基本满足标准需要。锰的摄入量均高于RNIs;维生素A和维生素E的摄入量均高于RNIs;维生素C和烟酸的摄入量均高于RNIs;除男性60~70岁组的核黄素摄入量刚刚达标外,其他各年龄组的核黄素和硫胺素的摄入量均未达到RNIs。8.2型糖尿病患者血液指标检测,空腹血糖男性为8.3 mmol/L,女性为8.1mmol/L,糖化血红蛋白两组均为8.2%,高于正常值。男性的高密度脂蛋白胆固醇检验值低于正常值,其他检验指标均为正常值。对96名糖尿病患者进行血清氧化/抗氧化指标的检测,血浆铁还原能力、超氧化物歧化酶均低于参考值,而丙二醛高于参考值。第二部分蜂胶对2型糖尿病患者能量代谢和氧化应激的干预作用及其机制研究1.两组研究对象膳食能量摄入、蛋白质、脂肪及碳水化合物摄入量均无显著差异。除了维生素C和钙的摄入量在蜂胶组显著低于对照组外(P<0.05),维生素A、维生素B、维生素E和钾、钠、铁、锌、硒的摄入量在两组之间也没有明显差异。两组研究对象的腰臀比均大于0.9,BMI大于24 kg/m2。两组之间的体重、BMI和WHR均无明显差异。2.干预前,两组之间的血糖、糖化血红蛋白、胰岛素水平、FRAP(ferric-reducing antioxidant power)、SOD(superoxide dismutase)、GSH(glutathione),GSH-Px(glutathione peroxidase)、MDA(malondialdehyde)、LDH(lactate dehydrogenase)、AR(aldose reductase)均无明显差异。3、蜂胶干预后,蜂胶组的血糖、糖化血红蛋白、胰岛素水平、醛糖还原酶和脂联素与对照组相比均无明显差异,蜂胶组GSH和总多酚水平明显高于对照组(P<0.05),而羰基和LDH水平明显低于对照组(P<0.05),两组之间FRAP、SOD、GSH-Px、MDA和ox-LDL水平均无明显差异。蜂胶组的IL-1β和IL-6水平明显高于对照组(P<0.05),而TNF-α水平明显低于对照组(P<0.05)。结论1.针对本次横断面研究,设计了天津市居民适用的食物频率法膳食调查问卷。以询问被调查者过去1个月以来的膳食摄取的频率,设置了膳食和生活习惯问题,考虑了糖尿病患者的饮食习惯,利于被调查者习惯性摄取的食材、膳食习惯等数据的提取。2.天津市糖尿病患者多发病于中老年,且体重指数较高,可见控制饮食、防止体重增长是对预防中老年糖尿病发病非常重要的。2型糖尿病患者营养素摄入量与RNIs或AIs的相比,存在能量和蛋白摄入不足、部分微量营养素摄入不足的状况,应加强对糖尿病患者的宣教,促进其对膳食调节的重视和实施。3.此次调查发现糖尿病患者的空腹血糖、糖化血红蛋白的控制不甚理想,体内抗氧化物质偏低,脂质过氧化物升高,说明存在一定程度的应激损伤。因此,通过添加其他营养素来改善体内氧化应激水平、控制疾病进展成为摆在我们面前的一个重要课题。4.蜂胶干预后,蜂胶组的血糖、糖化血红蛋白、胰岛素水平、醛糖还原酶和脂联素与对照组相比均无明显差异,提示蜂胶对2型糖尿病人的糖代谢没有显著影响。5.蜂胶可以显著提高糖尿病患者体内血清GSH含量,提示蜂胶具有增加抗氧化物质含量的作用。蜂胶可显著增加血浆总多酚含量,提示蜂胶中的多酚类成分可以被机体有效吸收,增强机体抗氧化能力。6.蜂胶可明显降低2型糖尿病患者的血清TNF-α、LDH活性,血清IL-1β和IL-6显著升高,提示蜂胶具有降低炎性反应的作用。