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目的：目前治疗终末期肝病的最有效的方法是肝移植,但是由于供肝短缺、移植后免疫排斥等一系列问题,该疗法无法在临床广泛展开,因此需要寻求新的治疗方法。多项研究表明,干细胞移植能够达到缓解和改善肝硬化病情的效果。骨髓间充质干细胞由于取材方便、数量多等优点,成为干细胞理想的来源之一。本实验通过体外细胞非接触式共培养体系来研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)治疗肝硬化的机制。方法：人BMSCs细胞株、人肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSCs)株(LX2)复苏后传代使用。四甲基偶氮哇蓝(MTT)法测定两种细胞培养1-9天的0D值,绘制生长曲线。在6孔塑料细胞培养板内架上半透膜(transwell insert),建立上下双层细胞共培养体系,上层接种BMSCs(1×105cells/mL)2mL,下层接种HSCs(1×105cells/mL)2mL,常规培养。实验分组：①对照组：HSCs单独培养；②实验组：BMSCs与HSCs共培养。以上体系培养观察24h和48h。于倒置相差显微镜下动态观察HSCs的细胞形态；MTT法检测共培养体系24h、48h、72h HSCs的增殖能力；流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测共培养体系24h、48hHSCs凋亡率；Hoechst染色显示HSCs内凋亡小体；ELISA检测HSCs分泌的TGFβ1含量；RT-PCR检测共培养体系48hTGFβ1、Smad7的mRNA表达：Western Blot检测共培养体系24h、48hTGFβ1、Smad7的蛋白表达情况。结果：BMSCs在24h未显示抑制HSCs增殖的现象,48h、72h明显抑制HSCs的增殖并呈现时间依赖性。24hBMSCs未促进HSCs凋亡,而48hBMSCs促进HSCs凋亡。对24h、48h时间段上清液中TGFβ1浓度进行检测,实验组TGFβ1浓度明显低于对照组(P<0.05)。实验组共培养48h时,TGFβ1mRNA表达量低于对照组,Smad7mRNA表达量高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。实验组共培养24h、48h时TGFβ1蛋白表达量均低于对照组,Smad7蛋白表达量均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：BMSCS(?)可以抑制HSCS的增殖,促进其凋亡，机理可能为通过旁分泌抑制HSCS内TGFβ/S(?)d〕通路,上调smad7,下调TGFβ1,从而抑制肝纤维化。