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目的:研究晚期氧化蛋白产物(7)advanced oxidation protein products,AOPP(8)对人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung fibroblasts MRC-5,MRC-5)活性氧自由基(7)reactive oxygen species,ROS(8)及细胞外基质纤维连接蛋白(fibronectin,FN)及I型胶原(collagen I,Col I)的作用。方法:1.将MRC-5细胞分为人血清白蛋白(human serum albium,HSA)组,AO-PP时间效应组(7)0、12、24、48及72小时(8)和浓度效应组(7)0、50、100、200及400μg/ml(8),NADPH氧化酶抑制剂夹竹桃麻素(7)apocynin,APO(8)组(7)AOPP+APO(8)。2.用上述不同浓度的AOPP与MRC-5细胞共同培养不同的时间,MTT法检测细胞的活力。3.采用ELISA法检测FN、Col I及转化生长因子(7)transforming growth factor-β1,TGF-β1(8)在细胞上清中的浓度,通过RT-PCR检测各组细胞上述3个指标m RNA的表达。4.根据MTT实验结果选取AOPP作用最佳的时间点和浓度点刺激MRC-5细胞;流式细胞仪和荧光显微镜检测活性氧自由基ROS的表达。5.NADPH氧化酶抑制剂APO与MRC-5细胞预孵育1小时,加入200μg/ml AOPP刺激48小时,观察细胞内ROS的变化,从蛋白和基因水平检测FN、Col I及TGF-β1的表达。结果:1.不同浓度的AOPP(50、100、200、400μg/ml)作用于MRC-5细胞12、24、48及72小时,发现AOPP对MRC-5细胞具有显著的增殖作用(P<0.05(8),且在浓度为200μg/ml及时间48h达到峰值。2.FN、Col I及TGF-β1从蛋白分泌程度和基因表达水平均上调(P<0.05(8),且在浓度200μg/ml及时间48h时达到峰值;未经修饰的人血清白蛋白对上述相关纤维指标的表达无明显影响(P>0.05)。3.MRC-5细胞与200μg/ml AOPP作用48小时,与对照组相比,细胞内ROS水平显著升高(P<0.05)。4.MRC-5细胞与APO预孵育1小时,加入200μg/ml AOPP刺激48小时,细胞上清中FN、Col I及TGF-β1蛋白分泌减少且m RNA表达下调﹙P<0.05﹚,MRC-5细胞中ROS水平下降(P<0.05),未经修饰的人血清白蛋白对ROS的表达无明显影响﹙P>0.05﹚。结论:AOPP能够促进体外MRC-5细胞的增殖,引起细胞外基质FN、Col I表达上调及肺纤维化相关生长因子TGF-β1的表达增加,初步推测可能与NADPH氧化酶介导产生的ROS有关。