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[目的]本文通过对比氟中毒模型与实验性自身免疫性睾丸炎(experimental autoimmune orchitis,EAO)模型下小鼠睾丸中不同免疫细胞的浸润状态,来对氟中毒造成的睾丸炎症有更深一步的了解,为氟的生殖毒性机理的研究提供更多的证据。[方法]将ICR、BALB/C以及C57三种品系的雄性小鼠,每种品系的12只健康雄性小鼠随机分为对照组与EAO组,每组6只。对小鼠进行皮下注射,每次0.2mL,注射3次,每次间隔2周。对照组小鼠皮下注射完全弗氏佐剂(complete Freund adjuvant,CFA)乳化的磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS):EAO组小鼠皮下注射CFA的同系睾丸匀浆。在第一次免疫注射50d后,取小鼠附睾尾与输精管检测精液品质;取小鼠睾丸制作切片,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色后用于组织病理学观察。判定EAO的建立情况,可知BALB/C品系的小鼠容易建立EAO模型。接着本文将30只BALB/C小鼠,随机分为5组,即对照组、低氟组、中氟组、高氟组以及EAO组,每组6只。对照组以及EAO组供给去离子水,低氟组、中氟组以及高氟组分别给于含25、50、100mg/L氟化钠(sodium fluoride,NaF)去离子水。EAO组诱导EAO,方法同上。饲养期间,观察评估小鼠的生长状况。在150d,取小鼠股骨用氟离子电极法检测股骨氟含量;取小鼠血清检测抗睾丸抗体,并确定其抗原表达部位;取小鼠睾丸制作切片通过HE染色判断睾丸损伤情况,通过免疫荧光技术研究各种炎性细胞浸润状态,并用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbentassay,ELISA)检测各种细胞因子的表达情况。[结果]不同品系小鼠EAO模型建立的结果表明:与对照组相比,三种品系小鼠EAO组的精子活力和活率都显著降低(P<0.05);BALB/C小鼠EAO组的精子密度显著降低(P<0.05);睾丸组织形态学结果显示,BALB/C小鼠EAO组的睾丸损伤严重。氟对睾丸免疫细胞浸润结果表明:1.小鼠的股骨氟含量检测显示,与对照组相比,低氟组显著升高(P<0.05),中氟组与高氟组升高极显著(P<0.01)。2.生长性能检测显示,与对照组相比,高氟组小鼠体增重显著降低(P<0.05);EAO组睾丸指数显著降低(P<0.05)。3.精液质量检测显示,与对照组相比,高氟组的精子密度显著降低(P<0.05),EAO组降低极显著(P<0.01);高氟组精子活力显著降低(P<0.05),EAO组极显著降低(P<0.01);中氟组、高氟组以及EAO组精子活率降低极显著(P<0.01)。4.小鼠的睾丸组织切片HE染色显示,相比于对照组,中氟组、高氟组以及EAO组存在显著的生精障碍(P<0.05,P<0.01)。5.ELISA检测IL-6、TNF-α、IFN-γ以及IL-1 β,结果显示,与对照组相比,对于IL-6、TNF-α以及IFN-γ的含量检测,高氟组与EAO组显著升高(P<0.05,P<0.01),其他组的变化无显著差异;然而关于IL-1β的表达含量检测,所有组的变化均无显著差异。6.血清中抗睾丸抗体的检测及其反应部位的确定:Western Blot结果显示,三个氟化钠处理组的小鼠血清中都发现抗睾丸分子量约为15、25、35、40以及50kDa蛋白组分的抗体,并且这些抗体在EAO组小鼠血清中都可发现;免疫组化结果显示,与对照组相比,低氟组睾丸曲细精管里无明显染色;中氟组、高氟组以及EAO组,都可观察到曲细精管里精子细胞与精子都被染成棕黄色。而且除阴性对照外,所有组睾丸间质都被染色。7.小鼠的睾丸组织切片免疫荧光化学染色,与对照组相比,CD68的表达在中氟组和高氟组显著上升(P<0.05,P<0.01);CD56的表达无显著差异;CDllc的表达在中氟组、高氟组和EAO组显著升高(P<0.05,P<0.01);CD3的表达在低氟组、中氟组、高氟组和EAO组都呈极显著升高(P<0.01)。由此可知,在三个氟化钠处理组中,巨噬细胞(CD68)、树突细胞(CDllc)以及T细胞(CD3)存在不同程度的浸润;EAO组中,树突细胞与T细胞发生浸润;自然杀伤细胞(CD56)在三个氟处理组以及EAO组中均无浸润。[结论]1.BALB/C品系的小鼠比ICR与C57小鼠更易诱导EAO。2.从氟对睾丸免疫细胞浸润结果可以发现,氟诱导的睾丸炎症与EAO是相似的。