复心汤对大鼠心肌成纤维细胞PI3K-AKT-GSK3β通路的影响及其治疗心衰临床疗效观察

来源 :山东中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:E200902027
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目的:慢性心力衰竭(CHF)是各种原因导致的心脏病的严重阶段。本研究通过观察复心汤对正常大鼠心肌成纤维细胞磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3β(PI3K-AKT-GSK 3β)信号通路的影响,以分析复心汤治疗心衰时对该信号通路的作用,同时对CHF患者BNP水平、生活质量评分及中医症候积分等进行评估,探讨复心汤的疗效,为科研、临床提供一条新的研究方向。方法:本研究分为动物/细胞实验和临床研究两部分。1.动物/细胞实验:健康成年的雄性Wistar大鼠50只,随机分为生理盐水组(即空白组)、复心汤低剂量组、复心汤中剂量组、复心汤高剂量组、西药组,分别给予相应药物每天1次灌胃2周,末次灌胃后腹主动脉采血、分离、灭活、滤菌,制成含药血清;差速贴壁法培养原代心肌成纤维细胞;MTT比色法检测不同浓度含药血清对心肌成纤维细胞增值的影响,选择合适浓度血清培养基干预心肌成纤维细胞,采用Western-blot法检测PI3K、P-AKT、AKT、P-GSK-3β、GSK-3β的相对表达情况。2、临床疗效观察:将符合纳入标准的40例患者随机分为试验组、对照组,对照组予缬沙坦及常规西药治疗,试验组予对照组药物的基础上加服复心汤,6周后观察两组患者治疗前后BNP水平、中医症候积分、心功能分级(NHYA分级)及明尼苏达心衰生活质量评分等指标变化情况。结果:1.动物/细胞实验结果:(1)MTT结果:在上述条件培养基作用48h后,15%复心汤中剂量组、10%西药组、15%西药组细胞较正常组增殖明显(P<0.05)。(2)PI3K表达情况:与空白组相比,中药组及西药组PI3K相对表达量均明显降低(P<0.01),有显著统计学差异;与中药组相比,西药组PI3K表达量明显降低(P<0.01),有显著统计学差异。(3)P-AKT、AKT表达情况:与空白组相比,中药组及西药组P-AKT相对表达量均明显降低(P<0.01),有显著统计学差异;与中药组相比,西药组P-AKT表达量降低(P<0.05),有统计学差异;各组AKT比较,无统计学意义(P>0.05)。(4)P-GSK-3β、GSK-3β表达情况:与空白组相比,中药组P-GSK-3β表达量明显降低,有显著统计学差异(P<0.01),而西药组P-GSK-3β表达量未见变化,无统计学意义(P>0.05);与西药组比较,中药组P-GSK-3β表达量降低明显,有显著统计学差异(P<0.01);与空白组相比,中药组、西药组GSK-3β表达量均未见差异,无统计学意义(P>0.05)。2.临床疗效观察:(1)中医症候积分:治疗后两组中医症候积分均明显下降,有显著统计学差异(P<0.01),治疗后组间比较,试验组中医症候积分降低优于对照组(P<0.05)。(2)患者BNP水平:两组治疗后BNP水平均较治疗前明显改善,均有显著统计学意义(P<O.01);治疗后组间比较,试验组BNP降低优于对照组(P<0.05)。(3)心功能改善率:治疗后,试验组心功能改善总有效率85%,对照组总有效率65%,两组疗效相当,无统计学差异(P>0.05)。(4)明尼苏达生活质量评分:治疗后两组明尼苏达生活质量评分较治疗前均明显降低(P<0.01),组间比较试验组优于对照组(P<0.05)。结论:1.复心汤可降低PI3K、P-AKT的表达量,其效果劣于缬沙坦;2.复心汤可降低P-GSK-3β的表达量,其效果优于缬沙坦;3.复心汤可能通过调节大鼠心肌成纤维细胞内PI3K-AKT-GSK-3β通路起到治疗慢性心衰的作用;4.复心汤加西药可明显降低患者中医症候积分,其疗效优于西药组;5.复心汤加西药可明显降低患者BNP水平,其疗效优于西药组;6.复心汤加西药可明显改善患者的生活质量(明尼苏达生活质量评分),其疗效优于西药组。
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