风湿性疾病缠绵难愈,反复发作,其中有些治疗不当或久治不愈,最终致残,给患者及其家属身心及经济上带来了重大的损害及负担,关节疾患大都呈慢性、进展性过程,随着人类寿命的延长而发病数增多。在临床上西医学尚无特殊有效的根治方法,而西药主要使用非甾体抗炎药物、糖皮质激素、氨甲喋呤、环磷酰胺等药物缓解症状,但远期效果不理想,且毒副作用难以接受,因此开发治疗风湿性疾病的中药复方制剂显示出良好的前景。疗筋涂膜剂来源于临床验方,由我院传统制剂疗筋膏改良研制而成,具有活血祛瘀,消肿止痛的功效,主要用于治疗风湿性疾病及外伤性疾病。作为医院院内制剂用量较大,临床疗效满意,但存在基础研究工作缺乏,制剂工艺落后,还停留在传统膏药基础上、质量标准不完善、用量大及携带使用不便等诸多不足,本课题采用现代科学技术手段,将医院传统验方开发成新型中药经皮给药制剂疗筋涂膜剂,使其提高药物生物利用度,膜的形成减少了皮肤表面水分的蒸发,促进了水合作用和溶解角质作用,使药物透过角质层逐渐释放药物,更好的发挥治疗作用,同时具有使用携带方便等优点。本论文按照国家药品审评中心新药开发指导原则研制成符合“三小”、“三效”、“五方便”的中药新剂型。主要研究结果如下:1.疗筋涂膜剂的提取纯化工艺研究根据各味药材化学成分和药理作用,结合制剂工艺特点及大生产的实际、环境保护的要求,首先对白芷挥发油提取工艺考察,试验结果表明,以水蒸气蒸馏法提取白芷挥发油,白芷药材打成粗粉,加入10倍量水,浸泡一夜后提取至油量不再增加,挥发油含量仅为0.04%,提取效果不佳,而大生产上更难达到较理想的提取效果,故先提取挥发油,然后提取香豆素类成分的工艺不具可行性。文献等研究表明醇提液有效成分提取效果明显优于水提液,有效成分含量与镇痛效果呈相关性。从大生产及药理药效的试验结果考虑,白芷药材直接和其他药材混合醇提。故选取处方中大黄、两面针、白芷用乙醇提取,以大黄素成分、醇浸膏得率为指标,采用正交设计L9(34)对提取参数进行优选,最终选取药材加70%乙醇提取两次,第一次加6倍量提取1.5h,第2次加6倍量提取1h的乙醇提取工艺;选取赤芍、黄芩、苏木用水提取(黄芩沸水时投料)。以芍药苷、水浸膏得率为评价指标,采用正交设计L9(34)对提取工艺参数进行优选,结果表明,药材加水10倍量,浸泡时间为1.5h,提取2次,每次提取时间为1.5h条件下,芍药苷含量及水浸膏得率最高,结果以此条件为最佳水提工艺;对水提工艺进行了除杂研究,进行一系列的合理性验证,比较了水提醇沉、自然沉降、离心等几种除杂方法,最终选定了水提70%醇沉工艺,并通过测定水提液、浓缩液、醇沉液中芍药苷的含量,验证了工艺的可行性。2.疗筋涂膜剂的制备工艺研究以成膜时间和外观质量为指标,采用单因素考察和正交试验优化疗筋涂膜剂的制备工艺,首先采用单因素试验从PVA-1788、PVA-0588、PVA-124、白及胶、甘油、乙醇、丙酮、氮酮、蒸馏水等基质中筛选成膜材料的基本处方,然后通过正交试验对影响涂膜剂的主要基质用量进行优化,选取最佳涂膜剂制备基质处方配比为,PVA-124:乙醇:丙酮:蒸馏水=1:4:2:10。3.疗筋涂膜剂透皮促进剂的筛选及体外经皮渗透行为的考察采用离体透皮吸收试验研究该制剂的经皮渗透行为,分别考察渗透介质、离体皮肤冷冻保存时间、加入单一及复合透皮促进剂对疗筋涂膜剂中芍药苷体外经皮渗透行为的影响,以拟合度(相关系数)为指标,考察零级、Higuchi等不同的拟合方程在该制剂中的应用,通过试验研究暂确定丙二醇:冰片:氮酮(5%:8%:3%)为疗筋涂膜剂的化学渗透促进剂,以相关系数为判断标准,Higuchi方程拟合效果最佳,相关系数都在0.95以上,不同促渗剂作用下疗筋涂膜剂中芍药苷的经皮渗透行为均接近Higuchi释药方程。4.疗筋涂膜剂的质量标准研究在质量标准研究中,对制剂外观质量、相对密度、PH值、成膜时间、95%乙醇浸出物、炽灼残渣、酸不溶性灰分、总固体量等进行了测定;定性鉴别采用传统TLC和微乳TLC法,建立了大黄、赤芍、白芷、苏木的传统TLC鉴别,建立了黄芩、苏木、两面针的微乳TIC鉴别方法;含量测定经过反复实验,最终建立了君药大黄中芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、赤芍中芍药苷的HPLC含量测定方法及挥发性物质冰片、薄荷脑中龙脑、异龙脑和薄荷脑的GC含量测定方法,并进行了方法学考察,结果表明:用于含量测定的方法简便可靠,重现性好,为控制产品的质量、保证药物疗效提供了理论依据。5.疗筋涂膜剂的稳定性研究采用FDA推荐的稳定性加速试验方法将样品3批在温度为35～40℃,RH75%±5%条件下保存,在第0、1、2、3、6个月取样检测,各项指标均符合规定。表明:样品塑料瓶包装在35～40℃,RH75%±5%条件下放置6个月,初步稳定性较好。中药紫外谱线组法应用在该制剂影响因素试验研究中,结果表明本品在高温下(80℃)不稳定,在高湿度及强光照射下稳定,为该新药贮存条件、包装材料选择提供了依据。6.疗筋涂膜剂的皮肤给药安全性评价皮肤给药急性毒性试验表明疗筋涂膜剂在给药期间和给要后7天内大鼠皮肤毛发、眼和粘膜、呼吸、行为活动均正常,无论是完整或破损皮肤给药,除涂药部位稍变红外,其余部位及各个系统均无明显异常,未见死亡,于对照组比较无差别。结果表明该制剂皮肤给药无急性毒性反应,安全度较大。单次及多次给药皮肤刺激性试验表明疗筋涂膜剂完整皮肤及破损皮肤的涂药均未见明显红斑、水肿、色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄等情况,组织学检查无明显病变,皮肤刺激性为轻度。皮肤过敏性试验表明疗筋涂膜剂对豚鼠皮肤未见红斑、水肿等皮肤变态反应,也未见豚鼠哮喘、站立不稳或休克等全身变态反应情况发生。试验结果提示,疗筋涂膜剂对皮肤基本无变态反应。