轻度认知障碍和阿尔茨海默病患者血液中视锥样蛋白-1浓度的研究

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背景:阿尔茨海默病(AD)为神经系统退行性疾病,是痴呆的主要类型,中国65岁以上老人AD的患病率达3-7%,是威胁老年人健康的主要疾病之一。AD发病隐匿,早期诊断困难,晚期产生不可逆性认知缺损,药物治疗效果欠佳。因此,AD的早诊断、早干预对延缓认知减退、改善社会功能、减轻家庭及社会负担意义重大,同时也是防治本病的重要途径。国内外研究人员围绕AD发病机制对AD早期诊断的标志物进行了不断探究。在AD的发病机制中,其中存在钙稳态和钙信号异常,而钙离子(Ca2+)是中枢神经系统细胞内外信号传导的重要第二信使,它参与了神经突触传递、基因表达、细胞凋亡等病理生理过程。神经元细胞内Ca2+水平受中枢神经系统钙传感蛋白(NCS)调控。视锥样蛋白-1(VILIP-1)通过影响神经元细胞内Ca2+介导的信息传递及蛋白表达,增加神经元细胞的易损性及细胞毒性,进而诱发神经元死亡;其在大脑皮质及海马区高表达。VILIP-1与阿尔茨海默病之间的关联在文献中有报道,研究表明脑脊液中VILIP-1浓度在阿尔茨海默病患者中明显增高。VILIP-1能反映神经元损伤,从而可能作为AD的新的潜在体液生物标志物。由于脑脊液采集有创性,患者依从性、配合度欠佳,而血液收集相对简便、能反映脑代谢,已成为目前AD生物标志物的研究热点。AD患者血液中VILIP-1浓度是否有改变,疾病早期阶段,即AD所致轻度认知障碍阶段(AD所致MCI)是否也存在血液中VILIP-1浓度改变,VILIP-1能否作为AD早期诊断、反映疾病的严重程度的潜在生物标志物,能否检测疾病的进展及药物治疗效果?这都有待于进一步探究。目的:探究AD及AD所致MCI患者血液中VILIP-1的浓度水平,并探究其作为AD生物标志物的可行性及在AD早期诊断、监测疾病进展中的意义。方法:本研究共入组58名研究对象:AD组20例(其中男8例,女12例),AD所致MCI组19例(其中男9例,女10例),正常对照组19例(其中男9例,女10例)。AD组诊断符合美国国家衰老研究所(National Institute of Aging,NIA)和阿尔茨海默病学会(Alzheimer’s Association,AA)于2011年4月19日在Alzheimer&Dementia杂志上发表的新诊断标准(NIA-AA标准)。AD所致MCI组的诊断符合NIA-AA标准中AD所致MCI的核心临床诊断标准。所有样本采集晨血5ml,离心保存备用。通过ELISA法测定VILIP-1浓度。自动多功能酶标仪测定样本OD值,CurveExpert1.4软件绘制标准曲线,运用拟合公式计算出相应浓度值。实验数据通过SPSS19.0进行统计分析,计量资料采用均数±标准差(x±s)表示,组间比采用方差分析,相关性采用Pearson及Spearman分析,以P<0.05为有统计学差异,P<0.01为有显著统计学差异。结果:AD组平均年龄77.35岁,AD所致MCI组平均年龄77.11岁,正常对照组平均年龄73.95岁。三组样本在年龄及性别上无统计学差异。AD组MMSE得分(15±3分)及AD所致MCI组MMSE得分(23±2分)均低于正常对照组MMSE得分(27±2分),并且差异均有统计学差异(P<0.01);AD组MMSE得分较AD所致MCI组低,差异有显著统计学意义(P<0.01)。AD组血液中VILIP-1浓度(9.0±2.9 pg/ml)较正常对照组血液中VILIP-1浓度(3.3±1.7 pg/ml)显著增高(p<0.01);AD组血液中VILIP-1浓度较AD所致MCI组血液中VILIP-1浓度(6.5±3.1 pg/ml)显著增高(p<0.01);MCI组血液中VILIP-1浓度较正常对照组血液中VILIP-1浓度显著增高(p<0.01)。血液中VILIP-1浓度与MMSE得分呈负相关(r=-0.463,p<0.01),与年龄呈正相关(r=0.417,p=0.01)。结论:随着AD疾病进展,患者的认知功能逐渐减退。AD及AD所致MCI患者血液中VILIP-1水平增高,且血液中VILIP-1浓度与MMSE得分呈负相关。血液VILIP-1可能是AD新的潜在生物标志物,对疾病的早期诊断、反映疾病严重程度及监测疾病进展有一定临床意义。
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