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目的:多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma,MM)是一种以浆细胞异常克隆为特征的B细胞肿瘤,其是第二大常见的血液系统恶性肿瘤。近年来,由于对MM生物学特征、细胞遗传学异常以及肿瘤发病机制的进行了深入研究,目前有一些新的靶向治疗药物如蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂、CD38单克隆抗体等应用于MM患者,提高MM患者的缓解率,但目前仍是一种无法治愈的恶性疾病。神经节苷脂GM3是鞘糖脂的一种,其特征是含有唾液酸,并且有研究发现其与肿瘤形成有关。探讨外源性神经节苷脂GM3对人多发性骨髓瘤U266细胞生长的影响及初步探讨诱导U266细胞凋亡的可能机制。方法:1.观察神经节苷脂GM3对U266细胞的生长抑制作用:收集U266细胞(对数生长期)加入不同浓度(0μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L)神经节苷脂GM3作用48 h后应用MTT法检测其增殖抑制率。2.检测GM3对U266细胞诱导凋亡的作用:利用流式细胞术检测不同浓度(0μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L)神经节苷脂GM3对U266细胞的诱导凋亡作用及对其细胞周期的影响。3.检测GM3对U266细胞Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达水平的影响:采用实时荧光定量PCR检测不同浓度(0μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、160μmol/L)神经节苷脂GM3引起的U266细胞Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达水平的变化。结果:1.神经节苷脂GM3具有抑制U266细胞增殖作用。在20~160μmol/L范围内GM3对U266细胞增殖具有抑制作用。不同浓度GM3实验组与空白对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);且神经节苷脂GM3对U266细胞的生长抑制作用具有剂量依赖性。2.GM3作用48 h后U266细胞的凋亡情况。U266细胞经神经节苷脂GM3作用后,对照组(0μmol/L)、20、40、80和160μmol/L组细胞早期凋亡率分别为(1.34±0.18)%,(29.13±1.15)%,(32.88±0.78)%,(42.2±7.19)%,(4.46±1.22)%,在GM3浓度范围为20~160μmol/L内,U266细胞随其浓度增加早期凋亡率增高。不同浓度GM3实验组与空白对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.GM3对U266细胞Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达水平的影响。U266细胞经神经节苷脂GM3作用后,随着药物浓度的增加,促凋亡基因Bax mRNA表达水平呈上升趋势,而抗凋亡基因Bcl-2 m RNA呈下降趋势。不同浓度GM3实验组与空白对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:1.神经节苷脂GM3能够抑制U266细胞增殖。在0~160μmol/L药物浓度范围内,其抑制率随着神经节苷脂GM3浓度增加而增高。2.GM3能够诱导U266细胞凋亡。利用流式细胞术(Annexin-Ⅴ/PI双标)检测不同浓度GM3对U266细胞的凋亡影响,本实验结果证实GM3可诱导U266细胞凋亡及使其阻滞在S期,且在一定范围内(20~160μmol/L),呈剂量效应关系。3.GM3诱导U266细胞凋亡的作用机制可能与Bcl-2 mRNA和Bax mRNA表达水平有关。GM3可能通过上调Bax m RNA表达水平和下调Bcl-2 mRNA表达水平诱导U266细胞凋亡。