小刺猴头菌[Hericium caput-medusae(Bull.:Fr.)Pers.]是猴头菌属(Hericium)食药用真菌,其发酵浸膏对治疗胃肠疾病,提高机体免疫力有良好功效,其发挥功效的主要成分之一是多糖。近年来,一些研究表明小刺猴头菌发酵浸膏多糖具有抗肿瘤、抗氧化、免疫调节、抑菌等功效。本试验对小刺猴头菌发酵浸膏多糖进行分级,得到5个分子量的多糖组分,分子量范围分别为:小于5000道尔顿(D)、5000~10000D、10000~20000D、20000~50000D、大于50000D。采用苯酚-硫酸法测定了HFCP及其各分子量组分的总糖含量。结果表明,HFCP中总糖含量(占风干重)为77.5%;各分子量组分总糖含量差异较大,分子量小于5000D的组分总糖含量最高,占总糖总量的97.7%,总糖含量由高到低的分子量组分顺序为:小于5000D>5000~10000D>大于50000D>10000~20000D>20000D~50000D。采用考马斯亮蓝G250染色法、Elson-Morgan法、硫酸-间羟联苯法和氯化钡-明胶比浊法对HFCP及其各分子量组分的可溶性蛋白、氨基糖、糖醛酸和硫酸基含量进行了分析。结果表明,HFCP的可溶性蛋白、氨基糖和糖醛酸含量较低,分别为0.31%、0.61%、0.64%,HFCP的硫酸基含量较高,为7.20%。对于各分子量组分,分子量大于50000D的组分可溶性蛋白含量最高,而氨基糖、糖醛酸和硫酸基的最高含量均出现在分子量小于5000D的组分,与总糖含量最高的组分相一致。本试验测定了小刺猴头菌发酵浸膏中的部分活性成分,包括多糖、多酚和黄酮等的含量(风干基础),分别为18.0%、5.43 mg/g和2.05 mg/g,这些测定可为其应用研究打下基础。为了解决农业生产中的一些实际问题,本试验选择肉鸡作为实验动物,并且严格按照肉鸡试验操作规程进行相关研究。数十年来,高生产性能和高饲料转化率是商品肉鸡生产追求的重要目标,但同时也带来一些不可避免的问题,如肉品质的下降和体脂肪沉积过多。肉鸡体脂肪沉积过多,会增加消费者患肥胖症、糖尿病和心血管疾病的风险,同时废弃的腹部脂肪和内脏脂肪会带来废物处理问题。目前,通过添加功能性饲料添加剂减少肉鸡脂肪沉积、改善肉鸡胴体品质已成为家禽营养学研究的热点。本试验研究了小刺猴头菌发酵浸膏多糖(polysaccharides from the fermentation concentrate of Hericium caput-medusae(Bull.:Fr.)Pers.,HFCP)对AA肉鸡脂肪和胆固醇沉积的影响;另外,从节省饲料添加成本考虑,不提取多糖,按多糖添加剂量直接以浸膏的形式添加到肉鸡日粮中,研究小刺猴头菌发酵浸膏(fermentation concentrate of Hericium caput-medusae(Bull.:Fr.)Pers.,HFC)对肉鸡脂类代谢的影响,同时测定肉鸡抗氧化和肉品质等指标,为低脂肉鸡的生产和开发菌类作物作为饲料添加剂提供依据。hfcp饲养试验动物分组情况如下:选用1日龄aa肉鸡480只随机分为4个处理,每个处理6个重复,每个重复20只。4个处理分别为:空白对照组(基础日粮)、3个水平的hfcp添加组(基础日粮中分别添加0.1%、0.3%和0.5%的hfcp),试验期42d。于试验的第21天和42天分别采样测定各项指标。通过研究hfcp对肉鸡血清脂类指标、腹脂沉积、盲肠短链脂肪酸(shortchainfattyacids,scfa)含量以及肝脏、肌肉、粪便中脂肪含量的影响,结果表明:1)日粮中添加0.3%和0.5%水平的hfcp可显著降低21和42日龄肉鸡血清甘油三酯(tg)含量(p<0.05),0.5%水平的hfcp添加组可显著降低肉鸡肝脏脂肪含量(p<0.05);2)0.3%和0.5%水平的hfcp添加组肉鸡的腹脂率显著低于空白对照组(p<0.05);3)日粮中添加hfcp对肉鸡腿肌脂肪含量、胸肌脂肪含量、粪便脂肪含量无显著影响(p>0.05);4)添加hfcp可显著增加肉鸡盲肠丙酸含量(p<0.05),显著降低盲肠乙酸和丙酸的比例(p<0.05);5)回归分析发现,肉鸡血清tg水平、肝脏脂肪含量、腹脂率均随hfcp添加水平的增加二次降低(p<0.05);6)变量间相关性分析表明,21日龄时,肉鸡盲肠丙酸含量与腹脂率显著负相关(r=-0.988,p<0.05),乙酸和丙酸的比例分别与血清tg含量(r=0.973)、腹脂率(r=0.977)显著正相关(p<0.05);42日龄时,肉鸡盲肠丙酸含量与腹脂率显著负相关(r=-0.995,p<0.05),乙酸和丙酸的比例与腹脂率显著正相关(r=0.977,p<0.05)。以上结果提示,在肉鸡日粮中添加hfcp可以显著降低血液tg含量,降低腹脂沉积,可能是通过调节肉鸡盲肠scfa的含量和比例而促进机体脂类代谢。通过研究hfcp对肉鸡血清、肝脏、肌肉、粪便胆固醇含量以及粪便胆汁酸排泄的影响,结果表明:1)在不同日龄阶段(21、42日龄),与空白对照组相比,日粮中添加0.3%和0.5%水平的hfcp可显著降低肉鸡血清中总胆固醇(tc)和低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)含量(p<0.05),显著增加血清高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)含量(p<0.05);2)0.3%和0.5%水平hfcp添加组肉鸡的胸肌、腿肌和肝脏中胆固醇含量均显著低于空白对照组(p<0.05);3)与空白对照组相比,日粮中添加不同水平的hfcp能够显著增加肉鸡粪便中胆汁酸的排泄(p<0.05);4)回归分析发现,肉鸡血清tc水平、肝脏、胸肌和腿肌胆固醇含量均随hfcp添加水平的增加二次降低(p<0.01);5)胆固醇沉积指标和胆汁酸间相关性分析表明,21日龄时,肉鸡粪便胆汁酸含量与肝脏胆固醇(r=-0.993)、腿肌胆固醇(r=-0.994)含量均显著负相关(p<0.05);42日龄时,肉鸡粪便胆汁酸含量与血清tc(r=-0.992)、肝脏胆固醇(r=-0.980)、腿肌胆固醇(r=-0.981)、胸肌胆固醇(r=-0.993)含量均显著负相关(p<0.05);提示肉鸡日粮中添加hfcp可能通过增加肉鸡粪便中胆汁酸的排泄,从而降低肉鸡血液、肝脏和肌肉中的胆固醇含量;6)胆固醇沉积指标和scfa相关性分析表明,21日龄时,肉鸡盲肠丙酸含量分别与肝脏胆固醇(r=-0.971)、腿肌胆固醇(r=-0.991)含量显著负相关(p<0.05),乙酸和丙酸的比例分别与血清tc(r=0.968)、肝脏胆固醇(r=0.999)、腿肌胆固醇(r=0.966)含量显著正相关(p<0.05);42日龄时,肉鸡盲肠丙酸含量分别与血清tc(r=-0.951)、肝脏胆固醇(r=-0.966)、胸肌胆固醇(r=-0.995)含量显著负相关(p<0.05),乙酸和丙酸的比例分别与血清tc(r=0.990)、肝脏胆固醇(r=0.996)、腿肌胆固醇(r=0.965)、胸肌胆固醇(r=0.994)含量显著正相关(p<0.05);推测hfcp的降胆固醇作用可能与其在盲肠发酵后scfa生成量和比例有关系。为了进一步探讨hfcp的降脂机理,本试验研究了hfcp对肉鸡肝脏脂肪合成关键酶—乙酰辅酶a羧化酶(acc)、脂肪酸合成酶(fas)基因表达量,以及胆固醇合成关键酶—β-羟基-β-甲基-戊二酸单酰辅酶a还原酶(hmgr)基因表达量的影响。结果表明:1)21日龄时,肉鸡日粮添加hfcp对肉鸡肝脏accmrna表达量无显著影响(p>0.05),42日龄时,各hfcp添加组肉鸡肝脏accmrna表达水平均显著低于空白对照组,且表达水平随hfcp添加水平的增加二次降低(p<0.001);2)在21和42日龄,0.3%和0.5%的hfcp添加组肉鸡肝脏fasmrna表达水平,以及0.3%的hfcp添加组肉鸡肝脏hmgrmrna表达水平均显著低于空白对照组(p<0.05),且表达水平均随hfcp添加水平的增加二次降低(p<0.01)。以上结果提示,在肉鸡基础日粮中添加一定水平的hfcp具有降低肉鸡肝脏脂肪和胆固醇合成关键酶acc、fas和hmgr基因表达的作用,进而可能降低了肉鸡肝脏脂肪和胆固醇合成,从而起到降低机体脂肪沉积,减少鸡肉胆固醇含量的作用。从节省饲料添加成本考虑,不提取多糖,按照多糖剂量直接以浸膏的形式添加到肉鸡日粮中,研究小刺猴头菌发酵浸膏对肉鸡脂类代谢、生长性能、抗氧化状态和肉品质的影响。试验动物分组情况如下:选用1日龄aa肉鸡600只随机分为5个处理,每个处理6个重复,每个重复20只。5个处理分别为:空白对照组(基础日粮)、抗生素组(基础日粮中添加5mg/kg黄霉素)、3个剂量的hfc添加组(基础日粮中分别添加0.56%、1.67%和2.78%的hfc),试验期42d。于试验的第21天和42天时测定脂类代谢和生长性能指标,42天时测定其它指标。通过研究hfc对肉鸡脂类代谢、生长性能、营养物质消化率、肠道微生物和肠道组织形态学的影响,结果表明:1)在肉鸡日粮添加hfc能够显著降低肉鸡血脂以及鸡肉脂肪和胆固醇含量(p<0.05);2)在肉鸡日粮中添加hfc不影响肉鸡的平均日采食量(p>0.05),与空白对照组和抗生素相比,hfc添加组显著提高了肉鸡的平均日增重,且平均日增重随hfc添加水平的增加二次升高(p<0.001);3)小肠和盲肠内容物中大肠杆菌数量随hfc添加水平的增加二次降低(p<0.001),乳酸杆菌数量和双歧杆菌数量随hfc添加水平的增加二次升高(p<0.001);4)饲料粗蛋白消化率随hfc添加水平的增加二次升高(p<0.001);5)肉鸡十二指肠、空肠和回肠的绒毛高度、绒毛高度和隐窝深度的比值随hfc添加水平的增加二次升高(p<0.001)。以上结果提示,不提取多糖,直接将hfc添加到饲料中,同样可以降低肉鸡脂肪和胆固醇沉积;同时,肉鸡日粮添加hfc能够提高肠道乳酸杆菌和双歧杆菌数量,降低大肠杆菌数量,改善肠道绒毛结构,提高饲料蛋白质利用率,进而提高了肉鸡的生长性能。通过研究HFC对肉鸡抗氧化状态和肉品质的影响,结果表明:1)肉鸡血清、肝脏和胸肌超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均随HFC添加水平的增加二次升高(P<0.05),丙二醛(MDA)水平随HFC添加水平的增加二次降低(P<0.001);2)肉鸡屠宰24 h时鸡肉pH随HFC添加水平的增加二次升高(P<0.001),滴水损失和烹饪损失随HFC添加水平的增加二次降低(P<0.01);3)肉鸡日粮添加HFC对鸡肉剪切力无显著影响(P>0.05);4)肉色分析表明,鸡肉亮度(L*)随HFC添加水平的增加二次降低(P<0.01),而红度(a*)和黄度(b*)随HFC添加水平的增加二次升高(P<0.01)。以上结果说明,肉鸡日粮添加HFC能够提高肉鸡机体抗氧化水平和肉品质。综上所述,小刺猴头菌发酵浸膏多糖各分子量组分总糖含量差异较大,分子量小于5000D的组分总糖含量最高。小刺猴头菌发酵浸膏多糖在肉鸡盲肠发酵后,发酵产物SCFA的含量和比例发生变化,肉鸡肝脏脂肪和胆固醇合成关键酶基因表达量下降,从而起到降低肉鸡脂肪沉积,减少鸡肉胆固醇含量的作用。小刺猴头菌发酵浸膏中含有多糖、多酚等活性物质,添加到肉鸡饲料中具有改善脂类代谢、调节肠道菌群、改善营养物质消化率、提高抗氧化状态、提高生长性能和肉品质的作用。