【摘 要】
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人组织型激肽释放酶基因家族(kallikreins,KLK)是丝氨酸蛋白酶家族的一个亚群。该家族包括15个基因,在多种肿瘤组织尤其是受激素调节的肿瘤组织中表达并与临床分期有关。KLK4
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人组织型激肽释放酶基因家族(kallikreins,KLK)是丝氨酸蛋白酶家族的一个亚群。该家族包括15个基因,在多种肿瘤组织尤其是受激素调节的肿瘤组织中表达并与临床分期有关。KLK4是其家族成员之一,国外研究发现KLK4基因表达与卵巢癌和前列腺癌的发生、发展密切相关,并具有潜在的临床应用价值。但迄今为止,尚无用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测KLK4 mRNA及其在乳腺癌组织中表达水平的报道。 目的 建立人KLK4 mRNA实时荧光定量检测方法,探讨KLK4基因在人乳腺癌组织中表达的临床意义。 方法 应用SYBR Green Ⅰ作荧光染料,利用GAPDH作内对照,建立检测KLK4 mRNA的FQ-PCR方法;用建立的方法检测64(39例癌组织,25例正常组织)例乳腺癌组织和正常乳腺组织中KLK4 mRNA的表达,并与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、CeγbB-2及肿瘤是否转移等临床病理指标进行统计学分析。 结果 建立的FQ-PCR方法扩增GAPDH和KLK4 mRNA的效率分别为0.98和0.96;检测GAPDH和KLK4的批内变异系数分别为0.8%和1.6%,批间变异系数分别为3.9%和2.4%;基因扩增产物DNA序列分析及熔解曲线分析表明方法特异可靠。 临床研究表明:正常乳腺和乳腺癌组织的KLK4相对表达水平分别
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