探讨实验性小肠移植术后诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)对移植肠运动功能的影响及在排斥反应中的作用,并观察L-N~6-(1-亚氨乙基)-赖氨酸(L-NIL)、青藤碱(sinomenine, SIN)对iNOS的阻断作用。 第一部分 大鼠小肠移植模型的建立 目的:建立稳定的原位及异位大鼠小肠移植模型。方法:利用显微外科技术,构建大鼠小肠移植模型。结果:实验阶段施行原位小肠移植47次,异位移植55次,手术成功率分别为85.10%(40/47)、87.27%(48/55)。结论:经过短期的显微外科训练,可建立稳定的原位及异位大鼠小肠移植模型,为进一步研究移植免疫反应、移植肠功能奠定良好的基础。 第二部分 iNOS在同系大鼠移植肠组织中表达的研究 目的:检测同系大鼠异位小肠移植手术不同时段移植肠iNOS的表达。方法:按实验过程分为8组,包括正常小肠组(开腹后切取)、冷保存供肠组以及行移植术后0h、1d、2d、3d、4d、7d组。取各组小肠肠段采用半定量RT-PCR及免疫组化方法检测分析iNOS mRNA及iNOS蛋白表达的变化,并行病理组织学检查。结果:1.冷保存供肠炎性损伤病理分级较正常小肠组织高(P<0.05),至术后1d病理分级最高(P<0.05),然后渐降低,至术后7d病理分级与正常组织相近(P>0.05)。2.iNOS mRNA及蛋白在正常小肠组织只有极微量表达,冷保存供肠iNOS表达迅速上调(P<0.05),术后1d移植肠iNOS表达水平达到高峰(P<0.05),然后迅速下调,术后7d移植肠iNOS表达水平接近正常小肠组织(P>0.05)。3.免疫组化检测发现移植肠肌层及