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目的:Hippo信号通路是在果蝇身上发现控制器官大小的重要信号通路，yap蛋白是其中重要核心组件。组织器官对外界机械张力转化为生物化学分子效应与Hippo信号通路密切相关。创面愈合及瘢痕形成涉及一系列复杂生物细胞学过程，增生性瘢痕的发生与多方面因素相关，如性别、年龄、体质、感染等，病理上表现则是成纤维细胞大量增殖及细胞外基质沉淀，yap蛋白与成纤维细胞感受瘢痕压力、增殖及生长因子的分泌密切相关。本实验拟通过观察兔耳创面愈合至增生性瘢痕形成这一过程中yap蛋白的表达、分布及变化，探讨yap蛋白在创面修复及瘢痕增生中的作用，为瘢痕的形成提供分子水平的理论依据，为瘢痕治疗提供新的思路方法及治疗靶点。 方法:选取10只新西兰大耳白兔（由泸州医学院动物实验中心中心提供），雌雄不限，体重平均2.5-3.0Kg。将每只兔子左耳设定为A组，右耳设定为B组，A组每只大耳兔用打孔器在左耳打3个直径0.6cm圆形全层皮损至软骨，并彻底破坏软骨膜，热凝止血;B组每只大耳兔耳用打孔器打3个直径1cm圆形全层皮损至软骨,彻底破坏软骨膜，热凝止血，每个创面间隔＞1cm。其后，每只兔子饲养条件相同，7天后祛除痂壳。14天时取靠近头部创面;30天时取兔耳中间创面;60天取剩下创面。将所取标本置于10％中性福尔马林中固定12小时，常规梯度酒精脱水，浸蜡包埋切片，做免疫组化组织学染色。Yap蛋白免疫组化染色阳性信号为棕黄色颗粒。yap图像分析方法:1、在400倍显微镜下分别观察各切片中表皮及表皮下细胞中yap阳性颗粒个数，并计算。每张切片观察5个视野取其均数进行比较。2、用Image-pro6.0图像分析软件系统，将yap的表达强度用IOD值表示，每张切片取5个视野，分别测定每个视野的IOD值并取其均数作为该标本的IOD值，进行比较。 结果:一、新西兰大耳白兔瘢痕造模成功率:A组造模出24个合格瘢痕，成功率为80％，B组造模出27个合格瘢痕，成功率为90％(模型成功标准:肉眼可见明显创面组织增生、质硬，瘢痕表面较周围正常组织高出2mm);二、显微镜下yap免疫组化染色结果:1、14天时，A组及B组创面周围组织向创面中心回缩，大部分创面干燥，显微镜下创面肉芽组织、炎性细胞及毛细血管增生，表皮细胞中yap蛋白主要表达于细胞质，表现为细胞质中可见细小棕黄色颗粒，此期成纤维细胞数量少，棕黄色颗粒少数发现于细胞核中;2、30天时，肉眼观察，创面愈合且瘢痕增生明显，增生瘢痕色红、质硬，瘢痕中心高于周围皮面，B组较A组瘢痕增生明显，纤维镜下看，瘢痕表面为薄层表皮细胞并伴角化，正常皮肤附件如毛囊、皮脂腺等缺乏，瘢痕下，部分成纤维细胞生成，呈梭形并排列整齐，棕黄色颗粒出现于成纤维细胞核，细胞质棕黄色淡染;3、60天时，肉眼观察，A组部分模型瘢痕较30天缩小，其余个别瘢痕较30天垂直直径增大，且硬度增加，显微镜下看，瘢痕表皮下大量成纤维细胞生成，成纤维细胞呈梭形并排列整齐，B组部分瘢痕成纤维细胞排列紊乱，漩涡状排列形成，个别瘢痕可见玻璃样变。4、70-90天观察，肉眼见瘢痕缩小，纤维镜下看，成纤维细胞减少，部分正常细胞结构消失玻璃样变。三、数据统计学分析:1、14天时，B组在阳性颗粒数、积分光密度、平均光密度数值上均高于A组，且P＜0.05，差异具有统计学意义;2、30天时，B组在在阳性颗粒数高于A组，P＞0.05，差异不具有统计学意义，积分光密度、平均光密度数值上均高于A组，且P＜0.05，差异具有统计学意义;3、60天时，B组在在阳性颗粒数高于A组，P＞0.05，差异不具有统计学意义，积分光密度、平均光密度数值上均高于A组，且P＜0.05，差异具有统计学意义;4、阳性颗粒数A组第14天:22.38±5.12，第30天:34.88±3.56，第60天:32.38±5.82，30天与60天数值均高于14天，P＜0.05，差异具有统计学意义，60天数值小于30天，P＞0.05，差异不具有统计学意义;B组第14天:35.13±6.12，第30天:39.63±5.68，第60天;34.50±2.4430天数值高于14天及60天，P＞0.05，差异不具有统计学意义，60天数值小于30天，P＞0.05，差异不具有统计学意义;5、平均光密度A组第14天:0.20±0.01，第30天:0.24±0.03，第60天:0.22±0.06，30天数值大于14天，P＜0.05，差异具有统计学意义，30天数值大于60天，P＞0.05，差异不具有统计学意义;B组第14天:0.22±0.01，第30天:0.30±0.04，第60天:0.31±0.02，30天大于14天，P＜0.05，差异具有统计学意义，30天小于60天数值，P＞0.05，差异不具有统计学意义;6、积分光密度A组第14天:1016.63±90.07，第30天:1368.00±169.01，第60天:1355.13±162.87，30天与60天数值均大于14天，且P＜0.05，差异具有统计学意义，30天数值大于60天，P＞0.05，差异不具有统计学意义;B组第14天:1358.38±186.57，第30天:1921.75±100.76，第60天:1911.88±114.00，30天与60天数值高于14天，P＜0.05，差异具有统计学意义，60天数值小于30天，P＞0.05，差异不具有统计学意义。 结论:1、瘢痕表皮细胞中yap主要表达于细胞质中;2、成纤维细胞细胞质与细胞核均可见yap蛋白的表达，但在瘢痕增生期间主要表达于细胞核中;3、yap蛋白的表达与创面面积大小呈正相关，创面面积越大，愈合后瘢痕中yap蛋白表达越多;4、yap蛋白不是持续贯穿表达于创面愈合致瘢痕退缩期间，当瘢痕开始萎缩时，yap蛋白表达减少。