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在中国,平均不到1秒钟就有一个患者因急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)失去生命,心血管疾病死亡占我国居民疾病总死亡率40%以上。溶栓疗法、经皮冠状动脉介入术(Percutaneous coronary interventions,PCI)可有效提高AMI患者的急性期存活率。然而冠状动脉再通后可能会出现心肌组织再灌注不完全,甚至无再灌注,这种现象称为无复流(No-reflow,NR)。NR可导致局部血液灌注不足和左心室功能障碍,甚至心源性死亡。目前临床尚缺乏治疗NR的有效手段,因此寻找防治冠状动脉再通后NR的药物具有重大意义。心悦胶囊是以西洋参茎叶总皂苷为原料生产的中药新药,临床主用于治疗气阴两虚型冠心病心绞痛。有研究报道,心悦胶囊具有减轻心肌缺血再灌注损伤的功效,但其对于NR的保护作用及机制尚未见文献报道。目的:观察心悦胶囊对大鼠心肌缺血再灌注无复流的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、心悦胶囊(400、800 mg/kg)组和阳性药前列地尔组。假手术、模型组灌胃(ig)给予0.5%CMC-Na 10 mL/kg,心悦胶囊400、800 mg/kg组ig给予相应药物10 mL/kg,1次/天,连续给药7天,阳性药前列地尔组分别在缺血及再灌注后立即静脉注射(iv)给药2 mL/kg。本实验通过结扎大鼠冠状动脉左前降支(Left anterior descending,LAD),缺血2 h,再灌注2 h,复制大鼠心肌缺血再灌注无复流模型。再灌注2 h后,采用多普勒超声检测大鼠心脏功能;Evans Blue、TTC、Thioflavin S染色后使用Image-Pro Plus 6.0分析心肌缺血面积(Area at risk,AAR)、心肌梗死面积(Area at infarct,AAI)及心肌无复流面积(Area at no-reflow,AAN);利用生化及ELISA试剂盒测定大鼠血清中CK-MB、AST及LDH活性;HE染色反映心肌组织病理改变;计数外周血白细胞;生化试剂盒检测心肌组织中MPO活力;免疫组织化学方法检测大鼠心肌组织中ICAM-1及CD62L蛋白表达水平;ELISA试剂盒检测心肌组织中炎性细胞因子水平;Western Blot检测心肌组织NLRP3炎性小体相关蛋白表达及其磷酸化水平。结果:1.假手术组大鼠均未出现心肌缺血、梗死及无复流现象;与假手术组比较,模型组大鼠心肌AAR/LV、AAI/AAR与AAN/LV均明显升高(P<0.01);与模型组比较,心悦胶囊400、800 mg/kg及阳性药均能明显减少大鼠心肌AAR/LV、AAI/AAR、AAN/LV(P<0.05或P<0.01)。2.与假手术组比较,模型组大鼠LVEF和LVFS明显降低(P<0.01),LVIDs明显升高(P<0.01),LVIDd无明显变化;与模型组比较,心悦胶囊800 mg/kg能使大鼠LVEF、LVFS明显升高(P<0.05),而心悦胶囊400、800 mg/kg及阳性药均能使LVIDs不同程度降低,但无统计学意义(P>0.05)。3.与假手术组比较,模型组大鼠血清中CK-MB、AST和LDH活性均显著升高(P<0.01);与模型组比较,心悦胶囊400、800 mg/kg均能降低大鼠血清中CK-MB、AST和LDH活性(P<0.05或P<0.01),阳性药亦可降低心肌缺血再灌注无复流大鼠血清AST和LDH活性(P<0.05),能降低CK-MB活性,但无统计学意义(P>0.05)。4.组织病理学结果显示:假手术组大鼠心肌组织无病理学改变;模型组大鼠心肌纤维间隙加大,大量红细胞渗出,炎细胞(多为中性粒细胞)浸润;心悦胶囊400、800 mg/kg明显改善大鼠心肌组织结构损伤,心肌细胞间有少量炎细胞浸润,心悦胶囊800 mg/kg组病理形态优于心悦胶囊400 mg/kg组,阳性药组病理形态与心悦胶囊800 mg/kg组接近。5.与假手术组比较,模型组大鼠外周血白细胞数明显增加(P<0.01);与模型组比较,心悦胶囊400、800 mg/kg及阳性药均能明显减少大鼠的外周血白细胞数(P<0.01)。6.与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织中MPO活力显著升高(P<0.01);与模型组比较,心悦胶囊400、800 mg/kg及阳性药均能降低大鼠心肌组织中MPO活力(P<0.01)。7.假手术组大鼠心肌组织中ICAM-1蛋白几乎无表达;与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织中ICAM-1阳性染色明显增多,IOD/Area比值升高(P<0.01),且均表达在血管内壁;心悦胶囊400、800 mg/kg组大鼠心肌组织中ICAM-1的表达水平较模型组均显著减少(P<0.01),阳性药效果与心悦胶囊800 mg/kg组结果相当。CD62L蛋白主要在淋巴细胞表面表达,假手术组大鼠心肌组织中CD62L蛋白几乎无表达;与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织中CD62L阳性染色明显增多,IOD/Area比值升高(P<0.01),且大部分表达在血管内壁;心悦胶囊400、800 mg/kg组大鼠心肌组织中CD62L的表达较模型组均显著减少(P<0.01),阳性药效果与心悦胶囊800 mg/kg组结果相当。8.与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织中IL-1β、IL-18、IFN-γ及TNF-α含量均显著升高(P<0.01);与模型组比较,心悦胶囊400、800 mg/kg均显著降低大鼠心肌组织中IL-1β、IFN-γ含量(P<0.01),心悦胶囊800 mg/kg显著降低大鼠心肌组织中IL-18含量(P<0.01),阳性药亦可降低心肌缺血再灌注无复流大鼠心肌组织中IL-1β、IFN-γ及TNF-α含量(P<0.01),心悦胶囊400、800 mg/kg能降低TNF-α含量,但无统计学意义(P>0.05)。9.与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织中NLRP3炎性小体相关蛋白表达均显著增多(P<0.01);与模型组比较,心悦胶囊400、800 mg/kg均能使心肌组织中蛋白表达明显减少,且呈剂量依赖关系(P<0.05或P<0.01),阳性药亦能降低大鼠心肌组织中NLRP3炎性小体相关蛋白表达(P<0.01)。结论:研究结果表明,心悦胶囊能明显减小心肌缺血再灌注无复流大鼠的心肌缺血、梗死及无复流面积,显著改善心功能,减少心肌三酶渗出,改善心肌组织损伤的病理学变化,其机制可能是通过抑制NLRP3炎性小体相关信号通路的激活,减轻炎症反应,从而减少白细胞在心肌微血管的大量聚集、黏附,最终减轻心肌缺血再灌注无复流现象。