脾切除对肝纤维化大鼠肝脏CTGF的表达及血清CTGF水平的影响

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目的本课题研究脾切除对肝纤维化大鼠肝脏CTGF的表达和血清CTGF水平的影响,从而探讨脾切除在肝纤维化治疗中的可能作用。方法雄性清洁级SD大鼠80只,随机分为正常对照组8只和模型组72只。对模型组大鼠皮下注射CCL4,建立72例肝纤维化大鼠模型。模型组大鼠随机分成三大组,分别于建模开始,建模第5周,及建模第10周切除大鼠脾脏,并设立同期假手术组作为对照组。第一、二组及其对照组于建模后第10周,第三组及其对照组于建模后14周分别取大鼠肝脏和血液标本。用HE染色检测肝纤维化程度,免疫组化方法测定肝脏CTGF的表达,应用HPIAS-1000电脑彩色图像系统对阳性目标进行定量分析,应用双抗体夹心ELISA方法测定血清CTGF水平。结果(1)CTGF1阳性物质主要位于肝间质细胞的胞浆内,呈棕黄色。CTGF阳性染色部位主要分布在汇管区、纤维间隔、炎症区,少数在肝窦内。(2)正常组大鼠和不同纤维化时期大鼠肝脏CTGF的吸光度值分别为:0.016±0.007,0.108±0.011,0.159±0.008;正常组大鼠和不同纤维化时期大鼠血清CTGF(ng/ml)含量分别为:3.211±0.225,11.91±0.595,22.008±2.308。统计结果均表明,随着肝纤维化的进展,大鼠肝脏及血清CTGF含量逐渐增加(P<0.01)(3)不同时期切脾组大鼠血清CTGF的水平分别为(ng/m1):7.064±0.326,12.245±0.448,17.001±0.252;而同期假手术组其血清CTGF的水平分别为(ng/ml):20.925±1.023,22.356±1.285,23.129±1.221。实验结果表明,各切脾组血清CTGF含量明显低于其同期假手术组(p<0.05)。(4)根据HE染色结果,建模开始时切脾再行肝纤维化诱导,肝纤维化进程缓慢;建模后第5周切脾,肝脏病理状态比对照组明显缓解;建模后第10周切脾,肝脏炎性改变和纤维化程度有一定减轻。(5)不同时期切脾大鼠肝脏CTGF的阳性细胞吸光度值(A值)分别为:0.049±0.011,0.072±0.013,0.098±0.018;而同期假手术组CTGF阳性细胞A值分别为:0.157±0.035,0.165±0.012,0.182±0.029。结果表明,各切脾组肝脏CTGF阳性细胞A值明显低于其对照组(p<0.05)。(6)模型组中各手术组大鼠肝脏及血清CTGF的含量采用单因素方差分析q检验进行均数的两两比较表明,切脾时间越早,肝脏及血清CTGF的含量越低,切脾时间对CTGF的降低有影响(p<0.05)。结论(1)随着肝纤维化程度的进展,大鼠肝脏及血清CTGF的阳性表达逐渐增强。(2)脾脏切除能降低肝纤维化大鼠肝脏CTGF的表达以及血清中CTGF的水平,有助于缓解肝纤维化程度。(3)肝纤维化进程中早期切脾对延缓肝纤维化进展有一定的作用。
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