缓激肽对离体的C6大鼠血脑肿瘤屏障钙激活钾电流的作用

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目的 经颈内动脉灌注缓激肽的类似物RMP-7能选择性增加抗癌药卡铂到达脑肿瘤组织,有效地延长恶性胶质瘤病人的生存时间。因此,颈内动脉灌注小剂量的缓激肽已经作为选择性开放血肿瘤屏障有效转运抗肿瘤药物到达脑组织的一种方法。缓激肽选择性地引起肿瘤组织血脑屏障开放被认为是缓激肽与血管内皮细胞上的B2受体结合,激活了一氧化氮合成酶,增加了细胞内cGMP生成的结果。近来有证据表明,钙激活性钾通道(KCa通道)和ATP敏感性钾通道(KATP通道)存在于脑毛细血管内皮细胞上。缓激肽灌流时能够引起细胞内Ca2+浓度增加,细胞内Ca2+浓度增加时,KCa通道被激活。在缓激肽、NO供体、cGMP引起的血管扩张开放过程中,KCa通道和KATP通道起到关键的作用,但是我们对KCa通道和KATP通道起到关键作用这一结论持怀疑态度,因此进行了如下的研究:有关缓激肽开放脑肿瘤血脑屏障的研究多数集中在动物实验上,由于在体实验的多因素相互影响,很难判断某一因素的关键作用。本实验是应用膜片钳全细胞记录方法观察缓激肽对离体培养的大鼠脑微血管内皮细胞和C6细胞钙激活钾电流(IKca)的影响,从离子通道的角度研究缓激肽选择性开通血脑屏障的机制,进一步明确KCa通道在其中的作用。 材料和方法 1.通过对大鼠脑微血管内皮细胞和C6细胞的培养,应用膜片钳全细胞记录模式记录上述两种细胞钙激活钾电流: 将培养后的大鼠脑微血管内皮细胞和C6细胞的小载玻片分别放入容积约1.0 mL平放于倒置显微镜上的浴槽中,选取胞膜光滑完整,胞浆均匀
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