棉粕源枯草芽孢杆菌发酵饲料消化酶活性的研究

来源 :石河子大学 | 被引量 : 15次 | 上传用户:yangyang502
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目的:本研究以枯草芽孢杆菌为试验菌,对发酵棉粕饲料中消化酶(植酸酶、蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶)活性及营养成分变化进行研究。采用4因子4水平正交设计,以发酵底物中消化酶活性为指标,优化底物中K+、Na+、Ca2+、Mg2+四种离子无机盐的添加量。本论文还探究了发酵棉粕在不同的干燥方法和干燥时间、不同的包装及储存时间对消化酶活性的影响,同时对其进行营养价值评定,为生产优质生物发酵饲料奠定基础。本研究的目的是将枯草芽孢杆菌产酶的特性与新疆的棉粕资源相结合,开发棉粕源枯草芽孢杆菌发酵饲料,为发酵饲料的加工处理提供理论依据。方法:本论文由五个试验组成。试验一:以枯草芽孢杆菌为研究对象,嗜酸乳杆菌、热带假丝酵母为参考对照,在相同的发酵条件下进行发酵,比较发酵产物中消化酶(植酸酶、蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶)的活性及营养成分变化。试验二:采用4因子4水平正交设计,以MgCl2(0.1%、0.2%、0.3%、0.4%)、CaCl2(0.25%、0.5%、0.75%、1%)、KCl(0.1%、0.2%、0.3%、0.4%)、NaCl(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%)的添加量添加到发酵底物中,共16个处理,测定不同处理发酵产物中消化酶活性,经正交方差分析得到MgCl2、CaCl2、KCl、NaCl四种无机盐在底物中的最适添加量。试验三:依据试验二的研究结果,获得棉粕源枯草芽孢杆菌发酵饲料,将发酵产物分别以普通干燥和真空冷冻干燥方法进行干燥,普通干燥以干燥温度(40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃)、干燥时间(24h、48h、72h)进行处理,共21个处理,比较消化酶的活性随着温度和时间的变化,确定最适的干燥方式。试验四:将烘干后的发酵产物分别采用普通包装和真空包装两种方法进行包装,放置时间设10d、20d、30d、40d、50d、60d六个梯度,测定各放置时间段消化酶活性的变化,选出酶活性高的包装储存方法。试验五:根据以上试验结果,制备优质棉粕源枯草芽孢杆菌发酵饲料,测定发酵前后饲料中植酸、小肽、纤维素含量,综合评定发酵产物的营养价值。结果:试验一:由枯草芽孢杆菌Z3、嗜酸乳杆菌S1、热带假丝酵母ZD-3分别发酵棉粕饲料,结果表明,(1)酶活性:Z3与S1均可产植酸酶,ZD-3不产植酸酶,且Z3组的植酸酶活性最高;三株菌株均产蛋白酶,且Z3组的酶活性最高;三株菌株均产淀粉酶,且ZD-3组酶活性最高;仅Z3组产纤维素酶;(2)营养成分:三株菌株发酵后,饲料中CP、EE、Ca、P含量较空白对照组均有不同程度的提高,Ash、NDF含量较空白对照组降低。Z3组CP、EE、Ca、P含量最高;Z3组NDF含量最低,ZD-3组Ash含量最低,且均与其他组差异极显著(P <0.01)。综合考虑,枯草芽孢杆菌Z3发酵棉粕产酶种类最多,且能较好地改善饲料品质,发酵效果最好。试验二:底物中各无机盐的添加量为MgCl2:0.2%、CaCl2:0.5%、KCl:0.3%、NaCl:0.2%时,各种酶的活性均能达到较高水平。此时植酸酶活性为73.82U/g,蛋白酶活性为57.4U/g,淀粉酶活性为50.46U/g,纤维素酶活性为5.09U/g。试验三:在普通干燥条件下,植酸酶、淀粉酶、纤维素酶在40℃、24h时活性最高,蛋白酶45℃、24h时活性最高;真空冷冻干燥条件下,植酸酶、蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶活性分别为:87.49U/g、60.23U/g、58.73U/g、6.05U/g,此干燥方法优于普通干燥。试验四:真空包装对酶活性的影响最小,在储存60d时,植酸酶、蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶仍保留96.02%、97.02%、97.3%、98.1%。试验五:棉粕经发酵后小肽的含量升高,NDF、植酸含量降低。小肽含量由发酵前的2.50%提高到3.84%,与对照组差异极显著(P <0.01);NDF含量较对照组降低了25.17%,植酸含量降低12.75%,均与对照组差异极显著(P <0.01)。表明棉粕经枯草芽孢杆菌发酵后能显著提高小肽水平,降低NDF、植酸水平,对提高发酵棉粕的利用率具有一定的实践意义。
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