【摘 要】
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顺铂是临床治疗卵巢癌常用的化疗药物。本研究以IGROV-1人类卵巢癌细胞系为模型对顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡和抗性产生的分子机制进行了探讨。首先采用基于SBS技术的Illumina高
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顺铂是临床治疗卵巢癌常用的化疗药物。本研究以IGROV-1人类卵巢癌细胞系为模型对顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡和抗性产生的分子机制进行了探讨。首先采用基于SBS技术的Illumina高通量测序平台建立了IGROV-1/CP顺铂耐药性卵巢癌细胞的miRNA表达图谱。以所获的序列长度与已知人类miRNA数据库中序列长度差异≤2和无碱基错配为限制条件,共找到53种已知miRNA。按在cDNA文库测序中的出现频度计算,出现频度≤10的低拷贝miRNA最多,占检测到所有miRNA种类的56.6%。其次,采用TaqMan实时定量RT-PCR技术对五种已经在蛋白质水平上发现与顺铂耐药性产生有关基因在顺铂敏感的IGROV-1细胞和顺铂耐药性IGROV-1/CP细胞中的表达差异进行了比较,发现其中AK1和GALT基因在mRNA水平上的差异与蛋白质水平的差异相平行。最后,用基因表达芯片分析了顺铂处理前后IGROV-1细胞系内转录组的变化,共找到了836种差异表达在1倍以上的基因。从中挑选出15个基因用实时定量PCR技术进行了验证,发现其中8个基因变化较为显著且与基因表达芯片分析结果基本一致。通过上述研究,发现了一些与顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡和抗性产生相关的重要基因,为进一步揭示相关分子机制打下了良好的基础。
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