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本文对山药种质资源的分步冷冻法和玻璃化法超低温保存技术进行了系统的研究。结果表明：(1)分步冷冻法超低温保存的最佳技术体系为：继代培养60d的试管苗于4℃低温下锻炼7d，然后切取1～1.5cm带芽的幼嫩茎段放入MS+10％DMSO的预培养基中预培养7d，以10％DMSO+5％M+5％PVP作冰冻保护剂，在0℃低温下对带芽茎段处理2h，然后在-20℃、-80℃下各处理2h，最后投入液氮保存，保存一定时间后，将材料取出，在37℃水浴中快速化冻，化冻后用MS+5％S的洗涤液洗涤4次，每次10min，后转入继代培养基MS+KT2mg·L-1+NAA0.02mg·L-1上，先于暗处培养14d，再转为光培养，即可再生出完整的新植株，再生苗与常温苗形态指标和生理生化指标差异不大。山药超低温保存的成活率随基因型而异，表现出明显的差异性，其中，B号山药的相对存活率和成活率最高，达84.96％和66.95％，南城的相对存活率和成活率最低，仅为29.09％和19.80％；(2)玻璃化法超低温保存的最佳技术体系为：继代培养60d的试管苗于4℃低温下锻炼7d，然后切取1～1.5cm带芽的幼嫩茎段放入MS+10％DMSO的预培养基中预培养7d，茎段预培养后先用60％PVS1在0℃下过渡60min，再用100％PVS1在0℃下脱水60min，最后投入液氮保存，保存一定时间后，将材料取出，在37℃水浴中快速化冻，化冻后用MS+7％S的洗涤液洗涤4次，每次10min，后转入继代培养基MS+KT2mg·L-1+NAA0.02mg·L-1上，先于暗处培养14d，再转为光培养，即可再生出完整的新植株，再生苗与常温苗形态指标和生理生化指标差异不大。山药玻璃化超低温保存的成活率随基因型而异，表现出明显的差异性，其中，嘉祥细长毛的相对存活率和成活率最高，分别达96.96％和79.85％，济宁牛腿米的相对存活率和成活率最低，仅为29.84％和24.01％。本实验建立的最佳超低温保存技术体系为山药尤其是怀山药种质资源的离体保存提供了一条有效的途径。