目的:人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)是一种小DNA病毒,其感染可以引起人类多种疾病,然而,一过性的HPV感染并不能导致肿瘤的发生,因为大多数HPV感染的患者均经过短暂的上皮细胞异常改变后自愈,因此,长期持续性的高危型HPV感染可能是肿瘤发生的始动因素,其中以高危型HPV16病毒感染最为常见,HPV16中的E6和E7蛋白是肺癌发生发展中的主要致癌基因,E6蛋白对抑癌基因p53有抑制作用,而E7蛋白对抑癌基因pRb起抑制作用。然而HPV16所致肺癌的机制尚不清楚。有报道称,硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)与抑癌基因p53之间存在着调控关系。TRX可以调控NF-ΚB的活性,在呼吸道上皮细胞中TRX可以诱导p65的去亚硝基化,进而激活NF-ΚB信号通路。另有报道,在包皮上皮细胞中,HPV16E6对NF-ΚB信号通路有激活作用。NF-κB信号通路的激活与肿瘤的发展有密切关联。近来有报道,NF-ΚB信号通路的激活可以通过促进葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,GLUT1)的膜定位来促进瓦博格效应,进而促进肿瘤的发展。HPV对NF-ΚB的激活是否通过TRX目前还不清楚,我们的前期研究已经证实在非小细胞肺癌中HPV16的感染能使GLUT1的表达增高,但是具体机制尚不清楚。我们的研究目的是揭示E6、E7、TRX、p65、GLUT1在肺癌细胞中的调控关系,为非小细胞肺癌的早期诊断和治疗提供新的策略。研究方法:本研究中,我们双向调控E6、E7、TRX,使用Western blot检测TRX、p65、GLUT1的蛋白表达变化;在肺腺癌细胞系A549中,下调p65,检测GLUT1的蛋白表达。利用免疫荧光检测p65在细胞中的分布与E6,TRX的关系。结果:在H1299细胞系中过表达E6,明显上调TRX的蛋白表达,进而上调p65、glut1的表达;在A549和SK细胞系中抑制E6,明显下调TRX的蛋白表达,进而使p65,GLUT1的表达下降;在H1299细胞系中过表达E7或在A549、SK细胞系中抑制E7,TRX的表达均不受影响,而GLUT1的蛋白表达水平会受E7的影响,E7上调,GLUT1的表达也会增加,E7受抑制,GLUT1的表达也会下降;在H1299细胞系过表达TRX明显上调p65的蛋白表达;在A549或SK细胞系中抑制TRX的表达,明显下调p65、GLUT1的蛋白表达。在A549细胞系中下调p65的表达,GLUT1的蛋白表达明显下降。另外在H1299细胞系中分别上调E6与TRX的表达,可以观察到p65的核内表达增加。结论:HPV 16 E6/E7只有长期持续性感染才能上调GLUT1的表达进而在HPV相关性肺癌细胞中发挥主要作用。E6上调肺癌细胞中glut1的表达可能是通过上调TRX进而促进p65的入核而增加GLUT1的转录而实现的。而E7虽能促进GLUT1的表达,但其机制与E6不同,具体机制有待后续研究。