一叶萩碱的提取工艺及抗疲劳活性的研究

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一叶萩碱(Securinine)是大戟科植物一叶萩[Securinega suffruticosa(Pall.)Rehd.]的主要生物碱,这种生物碱是一种特异性拮抗剂,它的受体是一种名为GABA的受体,机体的中枢神经系统很容易被一叶萩碱所兴奋,因此具有显著兴奋作用,该生物碱已经成为神经科,内科的一种重要的临床用药,此外也是各科室最常见的工具用药。根据最新的研究结果表明,一叶萩碱在医学上能明显的改善患有老年痴呆症患者的记忆力,极有可能经过进一步的临床试验发展成为预防甚至是治疗老年性痴呆症(Alzheimer Disease, AD)的药物。除此之外,一叶萩碱经由国内外学者研究发现还具有抑制肿瘤增生、抵抗细菌感染、抗疟疾、有效抑制病毒分子的反转录复制等诸多的生物学活性。因此,近年来关于一叶萩碱的研究增长速度很快。尽管一叶萩碱的作用越来越被人们所重视,但是一叶萩碱的提取工艺仍然十分落后,目前常采用有机溶剂浸泡提取法。这种提取工艺虽然工序简单,但是自身仍然有很多严重的缺陷和不足。如有机溶剂耗费量大,提取过程繁琐且周期太长,对环境污染严重,产品的得率和纯度偏低等。严重的阻碍了一叶萩碱的工业化生产以及其他功能的深入研究和开发。本论文采取传统的酸水浸泡提取提法、离子交换法以及索氏抽提法的相关工艺步骤进行结合的方法对一叶萩碱的提取进行了有效的优化,一叶萩碱的产量和纯度得到了进一步的提高,并对一叶萩碱是否具有抗疲劳活性进行动物实验验证,具体研究内容及结果如下:1采用此前传统的添加一定量的盐酸制成酸水溶液浸提一叶荻枝叶中的有效成分,然后用离子交换法将酸水液中的生物碱置换出来的工艺,从一叶萩植物枝叶中提取一叶荻碱,经过单因素试验与Box-Behnken法设计试验并利用Design-Expert软件对实验结果进行二次回归分析最终确定最优的生产工艺参数为液料比为19:1,水浴温度为81℃,萃取次数为3次,乙醇浓度为89%,一叶萩碱的得率为0.48%,纯度为91.5%。从而有效优化了一叶萩碱的提取工艺。2利用小白鼠建立动物抗疲劳模型,动物实验结果表明,注射一叶萩碱后,小白鼠的体重没有显著的变化,其中低剂量和中剂量组的一叶萩碱对小白鼠的负重游泳时间和转棒时间具有明显延长的作用,与此同时注射一叶萩碱能使运动后得小白鼠血液中的尿素氮含量明显降低,并能使其肝糖原的储备量得到有效提高。注射一叶萩碱后能使小鼠增强运动能力、能在体内储备各种糖原物质、有效的加速血液中尿素氮的代谢过程。经验证结果表明一叶萩碱的抗疲劳活性非常明显,并且这种功效随着腹腔注射剂量的提高而增强。
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