脂质体介导的cFLIP反义基因治疗人肺腺癌细胞的实验研究

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前言 目前,肺癌业已跃居人类肿瘤致死的第一位。全世界范围内,科学家一直积极地采用各种方法来治疗肺癌,但治疗效果不能令人满意,肺癌总的治愈率仍不足15%。随着分子生物学的飞速发展,人类对肺癌的发生、发展、转移的分子机制有了更深的认识。基因治疗已成为一种极具前景的新方法。反义脱氧寡核苷酸(Antisense oligodeoxynuclecotide,ASODN)是一段与mRNA或DNA特异性结合,并阻断其表达的人工合成分子。ASODN可封闭或抑制肿瘤细胞关键编码基因,从而特异性抑制肿瘤细胞增殖。 反义药物是以反义核酸技术为基础开发的,以治疗为目的、安全有效的新型药物。近年来,随着对反义寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODN)及其结构衍生物如硫代磷酸寡聚脱氧核苷酸(phosphorothioate oligodeoxynucleotides,PSODN)反义作用机理的阐明,大批以病毒、癌基因、细胞活性因子及其他疾病相关蛋白的基因为靶点的反义药物相继进入临床试验阶段,使反义药物的研究再次进入蓬勃发展时期。 本研究采用高转移的人肺腺癌细胞系SPCA-1,运用脂质体介导的反义寡核苷酸cFLIP转染该细胞,通过细胞增殖抑制实验及RT-PCR法观察cFLIPL/SmRNA是否有抑制SPCA-1细胞生长和cFLIPL/S蛋白表达的作用;同时应用形态学、病理学方法和流式细胞仪来观察cFLIPL/S mRNA是否有促进该细胞系凋亡的作用;最后观察cFLIPL/S mRNA的体内抑瘤效果,进而为肺癌的基因治疗提供一种新方法。 肺癌分子靶向治疗药物的研究已进入开发阶段,目前有众多的反义药物已进入临床实验阶段。本研究证明了反义寡核苷酸cFLIP转染人肺腺癌细胞后,可抑制肿瘤细胞的生长,并诱导其凋亡,从而为肺癌的反义基因治疗提供可靠的实验依据。
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