金雀异黄素联合阿霉素对卵巢癌A2780细胞增殖和荷瘤裸鼠肿瘤生长的作用研究

来源 :辽宁医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:candyyao007
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目的探讨金雀异黄素(genistein GEN)联合阿霉素(adriamycin ADR)对卵巢癌(Ovarian cancer)A2780细胞增殖和荷瘤裸鼠肿瘤生长的影响及其机制。方法把卵巢癌A2780细胞制成细胞悬液后,接种于SD品系裸鼠右后肢跟部皮下,制成卵巢癌裸鼠模型。实验分成4组进行:生理盐水组(裸鼠腹腔注射生理盐水0.2ml),金雀异黄素组(裸鼠腹腔注射c-myc GEN30mg/kg),阿霉素组(裸鼠腹腔注射ADR 20mg/m2),金雀异黄素联合阿霉素组(裸鼠腹腔注射c-myc GEN30mg/kg联合ADR 20mg/m2)。4周后处死裸鼠,剥取完整的肿瘤组织称重,并计算各组肿瘤抑制率。免疫组织化学方法检测c-myc在肿瘤细胞中的表达,免疫蛋白印记方法检测c-myc在肿瘤细胞中的表达量,四甲基噻唑蓝(Methy thiazoly1 tetrazolium,MTT)检测各组细胞的增殖能力,细胞黏附实验、细胞迁移(transwell)实验检测各组细胞的侵袭能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果肿瘤抑制率结果分析,与生理盐水组相比,金雀异黄素联合阿霉素治疗组、阿霉素组、金雀异黄素组,抑瘤率分别为(44.81±5.74)%,(38.45±4.25)%、(32.26±2.21)%差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学结果金雀异黄素联合阿霉素组、阿霉素组、金雀异黄素组均对c-myc表达,Western Blot检测显示与生理盐水组相比,联合治疗组、阿霉素组、金雀异黄素组c-myc表达量明显上调(P<0.05)。MTT方法检测显示空白对照组、GEN组、ADR组、GEN和ADR组,细胞活力分别为(100.0±0.0)%,(56.4±4.25)%、(59.26±2.21)%、(40.33±1.23)%。细胞粘附力检测GEN联合ADR组、ADR组、GEN组可降低A2780细胞的粘附力(P<0.05),而对LEC1细胞无影响。细胞迁移力实验检测显示GEN联合ADR组、ADR组、GEN组,细胞迁移率明显低于空白对照组(P<0.05)。流式细胞仪检测显示GEN联合ADR组、ADR组、GEN组,G0/G1期细胞数明显升高(P<0.05),S期细胞数明显降低(P<0.05),GEN联合ADR组、ADR组、GEN组细胞凋亡率明显高于空白对照组(P<0.05),且对LEC1细胞无促进细胞凋亡作用。结论1、GEN联合ADR可抑制裸鼠体内卵巢癌细胞及抑制体外卵巢A2780细胞的增殖、细胞的侵袭能力,促进肿瘤细胞的凋亡。2、GEN联合ADR抑制卵巢癌A2780细胞的增殖、侵袭能力,促进细胞凋亡其机制为降低肿瘤细胞对c-myc的表达,影响c-myc蛋白参与调控的癌细胞增殖和转移过程。
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