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在全球妇科恶性肿瘤名单中,宫颈癌的发病率居首位,且新增病率逐年上升,发病年龄趋于年轻化,中国更是患宫颈癌的重灾区,严重影响女性的生活质量。宫颈癌从原位癌进一步发展为浸润癌及转移癌,是造成患者生存率降低甚至死亡的重要因素。因此,探讨宫颈癌的发病与进展机制,是目前宫颈癌诊断、治疗及预后的一个重要课题,对提高患者的生存率及改善预后尤其重要。CLIC1亦称核氯离子通道蛋白27(chloride nclear channel-27,NCC27),相对分子质量约为27000,具有氯离子通道功能。研究证实CLICl在多种恶性肿瘤组织中高表达,例如胃癌、结肠癌、肝癌、胆囊癌等,且其高表达与肿瘤细胞迁移侵袭、淋巴道转移、恶性转化以及肿瘤干细胞耐药等密切相关,提示CLIC1可能是一个判断预后的重要因子。研究表明,上皮-间质转化能够促进宫颈癌细胞的侵袭、转移,促使宫颈病变组织恶变。过表达的CLIC1可以使上皮-间质转化过程中的E-cadherin表达降低,Vimentin表达增高,这与上皮-间质转化的发生过程一致。在我们的研究中,通过将CLIC1过表达重组质粒转染到宫颈癌Si Ha细胞中及运用si RNA干扰技术,从细胞水平研究宫颈癌的发生发展机制,以期为宫颈癌的早期诊断及治疗提供一定的依据。目的:探讨宫颈癌Si Ha细胞中改变CLIC1的表达对E-cadherin和Vimentin表达的影响,进一步分析CLIC1的表达与宫颈癌Si Ha细胞EMT的关系。方法:1.宫颈癌Si Ha细胞复苏及传代培养;2.转染CLIC1过表达重组质粒及CLIC1si RNA;3.运用RT-q PCR方法检测各组细胞(转染过表达质粒组;转染空白质粒组;未转染质粒组;si RNA转染组;si RNA阴性对照组)中CLIC1、E-cadherin、Vimentin m RNA的相对表达量;4.运用western blot方法检测各组细胞中CLIC1蛋白、E-cadherin、Vimentin的蛋白表达水平;5.运用SPSS19.0软件,组间和组内分别采用SNK法及LSD法进行统计分析。结果:1.RT-q PCR检测结果显示,过表达质粒组中CLIC1 m RNA的相对表达量(1.97±0.08)高于空白质粒组(1.15±0.02)和未转染质粒组(1.10±0.01),si RNA转染组Si Ha细胞中CLIC1 m RNA的相对表达量(0.67±0.03)低于未转染质粒组(1.10±0.01)及si RNA阴性对照组(1.17±0.02),差异有统计学意义(P<0.01)。2.RT-qPCR方法测得过表达质粒组细胞中Vimentin m RNA的相对表达量(0.98±0.04)高于空白质粒组(0.58±0.04)和未转染质粒组(0.53±0.06);E-cadherin m RNA的相对表达量(0.32±0.04)低于空白质粒组(0.62±0.04)和未转染质粒组(0.58±0.05),差异有统计学意义(P<0.01);3.RT-q PCR方法测得si RNA转染组Si Ha细胞中E-cadherin m RNA的相对表达量(1.12±0.06)高于未转染质粒组(0.58±0.05)及si RNA阴性对照组(0.64±0.04);si RNA转染组Si Ha细胞中Vimentin m RNA的相对表达量(0.39±0.05)低于未转染质粒组(0.53±0.06)及si RNA阴性对照组(0.54±0.04),差异有统计学意义(P<0.01)。而空白质粒组、未转染质粒组及si RNA阴性对照组细胞中CLIC1 m RNA、E-cadherin、Vimentin m RNA的相对表达量差别无统计学意义(P>0.05)。4.Western blot方法测得过表达质粒组中CLIC1表达水平(1.48±0.06)高于空白质粒组(0.78±0.05)和未转染质粒组(0.80±0.03);Vimentin表达水平(0.69±0.06)高于空白质粒组(0.40±0.10)和未转染质粒组(0.39±0.09);E-cadherin表达水平(0.23±0.07)低于空白质粒组(0.36±0.06)和未转染质粒组(0.34±0.04),差异有统计学意义(P<0.01)。5.Western blot方法测得si RNA转染组Si Ha细胞中CLIC1表达水平(0.45±0.02)低于未转染质粒组(0.80±0.03)及si RNA阴性对照组(0.85±0.04);si RNA转染组Si Ha细胞中Vimentin表达水平(0.26±0.04)低于未转染质粒组(0.39±0.09)及si RNA阴性对照组(0.40±0.05);si RNA转染组Si Ha细胞中E-cadherin表达水平(0.89±0.07)高于未转染质粒组(0.34±0.04)及si RNA阴性对照组(0.35±0.07)。差异均有统计学意义(P<0.01);而空白质粒组、未转染质粒组及si RNA阴性对照组相比较,差别无统计学意义(P>0.05)。结论:1.在宫颈癌Si Ha细胞中CLIC1过表达后,对宫颈癌Si Ha细胞EMT的发生起到促进作用。2.阻断CLIC1的表达可能对临床治疗宫颈癌具有积极意义。