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本文以见血青种子为材料,研究4℃下保存时间对种子活力影响,以及蜗牛酶和NaOH处理种子对萌发率的影响;以见血青茎段为材料,6-BA,NAA,S-3307为影响因子,设计3因子3水平实验,筛选诱导侧芽的最佳培养基;以野生见血青根及自然繁殖的小苗为材料,分离、提纯内生菌,将获得的内生真菌与种子和原球茎在锯末基质上共生培养,筛选出能促进种子萌发、对原球茎生长有益的真菌;以见血青小苗为材料,以锯末、松树皮和牛粪3种基质进行单形重心设计试验,以株高、茎粗为考察值,优化基质的配比;采用响应面优化法,以N、P、K 3种元素浓度为影响因子,建立模型,以见株高、茎粗为考察指标,优化营养液配比;以种植6、12、18、24个月及野生的见血青为材料,研究不同栽培时间下生长发育及有效成分的动态变化。结果表明:1、种子的活性受保存时间影响,随保存时间的延长而降低。现采的种子活性为93.80%,保存2、4、6周后,活性分别为75.20%、64.43%、56.62%,种子采收后立即播种效果最好。蜗牛酶处理后,可以提高见血青种子的萌发率,W-5组最明显,达71.03%,最佳组合为2 mg/mL的蜗牛酶处理40 min。NaOH处理后,2 mol/L的NaOH处理5 min的萌发率最高,为56.54%,但其他组萌发率均低于对照组,说明较高浓度的NaOH会抑制种子的萌发;S-3307、6-BA与NAA对茎段侧芽诱导率的最佳组合为MS+1.0 mg/L S-3307+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.5 g/L活性炭。2、根切段的出菌率高于根研磨液,出菌率随3种消毒剂消毒时间的增加而降低,其中0.13%ClO2消毒3 min的出菌率最高,为72.86%,2%NaClO消毒12 min的出菌率最低,为19.95%。出菌率会受季节的影响,冬季的出菌率最高,为72.69%。实验共分离出45种真菌,1种能明显促进见血青种子萌发,8种能促进见血青原球茎生长。原球茎形成幼苗之后,小苗生长缓慢,表明促进见血青种子萌发、原球茎分化及后期生长发育的内生真菌可能不是单一的真菌或真菌种类不同。3、采用单形重心混料设计,锯末、松树皮、牛粪的配比为36.7%、0%、63.3%时,株高具有最大预测值,为8.46 cm;当锯末、松树皮、牛粪的比例为16.7%、36.7%、46.7%时,茎粗具有最大预测值,为8.87 mm;经软件优化,当锯末、松树皮、牛粪比例为19.3%、30.1%、50.6%时,株高及茎粗2项指标达到最优,分别为8.21 cm和8.75 mm。对最优组合进行验证,测得株高与茎粗分别为8.19 cm、8.70 mm,与预测一致。N、K对株高的影响显著,P对株高的影响不显著,3种元素对茎粗的影响均显著。经软件优化,有利于株高、茎粗生长的最佳营养液组合为N、P、K比例为160.00 mg/L、150.00 mg/L、200.00 mg/L,在该组合下株高为8.24 cm,茎粗8.91mm,与预测值(8.32 cm、8.97 mm)相近。4、株高均随着栽培时间的增加先增加再后平稳,相同栽培基质下,栽培12个月、18个月与24个月株高差异均不显著,两者均与栽培6个月差异显著,在相同栽培时间下,两种栽培基质下的株高差异不显著。茎粗随着栽培时间的增加先快速增加后平稳,在相同栽培基质下,栽培12个月、18个月和24个月茎粗差异均不显著,三者均与栽培6个月差异显著;在相同栽培时间下,不同栽培方式的茎粗差异均不显著。树皮基质栽培18个月多糖含量最高,为122.97 mg/g,苔藓基质栽培12个月次之,为103.28 mg/g,树皮基质栽培24个月最低,为45.59 mg/g。不同栽培时间多糖含量差异均显著;在相同栽培时间下,苔藓基质栽培与树皮基质栽培差异显著,均与野生差异显著。野生见血青生物碱含量最高,为8.48 mg/g,树皮基质栽培24个月最低,为3.75mg/g。在相同栽培基质下,随着栽培年限的增加先增加再降低。在相同栽培时间下,苔藓基质栽培与树皮基质栽培6个月和18个月差异显著,野生与人工栽培差异显著。苔藓基质栽培12个月总黄酮含量最高,为3.54 mg/g,树皮基质栽培24个月最低,为0.99 mg/g。在相同栽培时间下,苔藓基质栽培与树皮基质栽培差异不显著;野生与苔藓基质栽培6个月栽培差异不显著,与其他栽培时间差异显著。在总酚含量方面,树皮基质栽培12个月总酚含量最高,为8.35 mg/g,苔藓基质栽培6个月最低,为3.85 mg/g。在相同栽培时间下,苔藓基质栽培与树皮基质栽培差异显著;野生与与苔藓基质栽培6个月差异不显著,与其他栽培时间差异显著。人工栽培下,见血青Fe、Zn的含量的变化为12个月>18个月>6个月>24个月,树皮基质栽培Fe、Zn的含量高于苔藓基质栽培。野生Se含量明显高于两种栽培基质,Pb含量远低于《药用植物及制剂外经贸绿色行业标准》的规定。综合考虑各项指标,结合成本及时间投入,见血青最佳采收时间为栽培后12个月。