X线照射供体对同种异体肢体移植排斥反应影响的实验研究

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目的 建立合适的同种异体肢体移植动物模型,完善同种异体肢体移植急性排斥反应的病理诊断,探索X线照射供体对同种异体肢体移植的影响,寻找预防同种异体肢体移植急性排斥反应的途径以及诱导肢体移植免疫耐受的可能性。 方法 一、Waster大鼠为供体,SD大鼠为受体,股骨髓内固定,手术中端端吻合移植物与宿主的坐骨神经、股神经,吻合股动脉和静脉各一条;手术后长效青霉素抗炎治疗,显微外科术后护理常规,观察移植后宿主及移植物的变化。 二、Wistar大鼠的后肢移植于SD大鼠后,于手术后的1d、3d、5d、7d和更长的时间点,将移植物进行病理检查。 三、5Gy的X线对大鼠进行全身照射后,于照射后即时、1d、3d、5d、7d五个不同的时间点取材包括后肢软组织和骨髓组织。病理检查大鼠肢体软组织的情况;不同的单克隆抗体标记骨髓不同的白细胞,流式细胞仪检测股骨骨髓白细胞、淋巴细胞、死亡白细胞和CD85及CD95情况,然后与没有进行照射大鼠的肢体组织和骨髓进行比较。 四、对Wistar大鼠进行5Gy的全身照射后1d,进行Wistar→SD大鼠的异体肢体移植,观察移植物的症状、体征和存活时间等,并与非照射组比较。 结果 一、Wistar→SD大鼠同种异体肢体移植后,1w左右移植的肢体发生急性排斥反应稳定;移植物的存活时间是12±2.4d,但移植物的坏死并不影咱宿主的生命体征。 二、移植物的病理检查提示,不同的时间点移植物的不同组织发生不同程度的排斥反应。 三、SGy的 X线全身照射大鼠后,即时、id和 3d肢体的软组织有轻度的放射性损伤发生,其损伤sd大多恢复,7d已经基本恢复正常;照射后即时白细胞死亡率最高,第U时淋巴细胞百分率最低,CD80没有统计学意义,CD95于放射后 id、3d和 sd较高,7d下降,但是,仅id有统计学意义。 四、X线对Ws大鼠进行SGy的全身照射后M进行WStar—SD大鼠的同种异体肢体移植,术后ZW投有发生急性排斥反应,3W左右移植的肢体长出新的体毛,移植物存活的时间是 24.7土 8.id,与非照射组相比移植物的存活时间有明显差异巾.05L 结论 一、i——so大鼠的同种异体肢体移植自然排斥反应再现稳定,其动物模型成立,适宜于进行同种异体肢体移植的病理和免疫方面的研究,但对手术者的显微外科技术要求高。 二、移植物发生急性排斥反应强弱的顺序是皮肤、血管、间质、肌肉、肌臃、软骨、骨组织。 三、SGy的 X线全身照射大鼠后,肢体软组织的放射性损伤可以恢复:id骨髓呈递细胞的死亡以凋亡为主,此时较适宜于进行同种异体肢体移植。 四、手术前对供体进行 SGy的全身照射,对 Wstar-SD大鼠的同种异体肢体移植急性排斥反应的发生有明显的预防作用,但其机制有待于进一步的研究。
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