【摘 要】
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利用红豆杉细胞大规模培养生产紫杉醇是解决紫杉醇药源问题的最有希望的途径之一,也一直是植物天然产物研究的热点。但是,目前红豆杉细胞培养依然没有进行工业化生产的主要原
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利用红豆杉细胞大规模培养生产紫杉醇是解决紫杉醇药源问题的最有希望的途径之一,也一直是植物天然产物研究的热点。但是,目前红豆杉细胞培养依然没有进行工业化生产的主要原因之一就是利用此方式生产紫杉醇的成本过高,阻碍了其产业化进程。获得高产紫杉醇的细胞株可一定程度上解决这一问题。论文成功从曼地亚红豆杉和东北红豆杉中诱导出愈伤组织,同时为了利用药用植物多倍体的优良性质建立了红豆杉四倍体细胞系,并对两种高产细胞系的特性进行了分析。结论如下:1.曼地亚红豆杉和东北红豆杉有较高的愈伤组织诱导率。两种红豆杉的嫩茎段外植体出愈率达到100%。离体叶片的出愈率略低。2 .激素的种类和配比对细胞生长率有较大的影响。在培养基中添加0.2mg/L6-BA,0.8mg/LNAA,0.2mg/L2,4-D适用于两种红豆杉细胞的继代培养。3.抗褐变剂和有机成分的添加对于红豆杉细胞的驯化具有显著的意义。活性炭的抗褐变效果要优于Vc和PVP。条件培养液的添加对红豆杉细胞培养具有非常显著的促生长作用。4.紫杉醇含量高的外植体其细胞系的紫杉醇含量也较高。曼地亚红豆杉细胞系的紫杉醇含量高于东北红豆杉和中国红豆杉的紫杉醇含量。5.四倍体红豆杉细胞系紫杉醇的产量高于对照细胞。二倍体细胞经秋水仙素处理后继代培养7个周期得到了四倍体细胞系,紫杉醇含量是原来细胞系的3.85倍。6.和产量较低的细胞系相比,高产紫杉醇的红豆杉细胞系具有生长速度慢,褐变程度高,细胞死亡率高,干鲜重比高等特点。
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