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目的:基于二代测序(NGS)技术,以评估ct DNA在肺癌EGFR检测中的可行性,并初步探索了液体活检在耐药监测中的应用价值。方法:随机选择2016年4月至2016年10月就诊于华中科技大学附属同济医院胸外科,行手术切除或活检的NSCLC患者24例。术前约4小时内使用EDTA抗凝管,留取患者约5-7ml全血。术后在我院病理科留取患者新鲜冰冻病变组织,-80℃冰箱储存。采用二代测序技术(NGS)对新鲜冰冻组织或血液样本进行EGFR基因突变检测,并结合ARMS法结果(胸外科临床检测结果),进行分析。本实验仅对我院临床常规检测的突变类型(WT、19-Del、L858R、T790M、L861Q、20-ins、G719X等)进行分析。同时对其中两例服用靶向药物(盐酸埃克替尼)患者ct DNA中EGFR突变状态进行随检,以探索了液体活检在耐药监测中的应用价值。数据使用SPSS21.0统计软件包进行数据分析与处理。结果:24例病人组织与血液样本EGFR检测结果中,其中组织样本ARMS-PCR法与组织样本NGS检测配对8例,这8例组织样本,ARMS-PCR法及组织NGS法共同检出野生型3例,突变型5例,且检测突变类型一致;组织ARMS-PCR与血浆配对的有23例,血浆中检测10例EGFR突变型,其中9例与组织检测出突变类型一致,血浆中有一例检测出L858R突变,而在组织中未检测L858R突变,而是检测出19-Del20-ins双突变。有6例样本,组织中检测出有EGFR突变,而血液中未检测出突变。以组织样本检测结果(ARMS-PCR)为判断的金标准,计算真实性和可靠性指标,分别计算所得ct DNA检测EGFR突变敏感度=63%,特异度=100%,假阳性率=0%,假阴性率=46%,阳性预测值=100%,阴性预测值=53.8%。根据诊断实验的一致性分析评价,得出kappa值为0.471,p=0.011,即血清检测EGFR基因突变与组织检测EGFR基因突变吻合度一般(kappa值0.41-0.60为中等一致性),两种检测方法具有一定的一致性。我们采用NGS测序以极高的灵敏度检测出EGFR突变,同时对两例病人继发耐药的随检,结果表明ct DNA在预测耐药方面较临床指标更加超前,是一项灵敏的检测指标。结论:灵敏度和特异度是反映真实性(检测结果与真实情况符合的程度)的指标,能反映出真实性的情况,本研究敏感度为63%,特异度为100%,表明血清检测EGFR基因突变有较高的真实性。本研究的阳性预测值为100%,阴性预测值为53.8%,表明可以获得一定的筛检收益,具有一定的参考价值,特别是阳性结果。我们实验的假阴性率为46%,即有6例样本,组织中检测出有EGFR突变,而血液中未检测出突变,肿瘤ct DNA在血液中含量极少以及DNA提取不成熟,可能是导致EGFR突变错误的阴性结果(假阴性率=42.9%)的原因。根据诊断实验的一致性分析评价,得出kappa值为0.471,p=0.011,两种检测方法具有一定的一致性。对两例病人继发耐药的随检,结果表明ct DNA在预测耐药方面较临床指标更加超前,是一项灵敏的检测指标。综上所述,ct DNA可用于EGFR基因突变检测及EGFR耐药突变监测。