近年来,含[2Fe-2S]簇的铁氧还蛋白引起了广泛关注。遗传分析表明它在许多铁硫蛋白的成熟中起着重要的作用,也是参与铁硫簇生物合成复杂机制的重要组分之一。我们克隆了嗜酸氧化亚铁硫杆菌（Acidithiobacillus ferrooxidans,A.ferrooxidans）ATCC 23270中铁氧还蛋白的基因,成功在大肠杆菌中进行了表达,并用一步亲和层析法对其进行了纯化,重组蛋白的紫外吸收光谱和质谱结果表明[Fe₂S₂]簇正确组装到铁氧还蛋白的活性位点。定点突变结果表明铁氧还蛋白中,Cys42、Cys48、Cys51和Cys87四个保守半胱氨酸与铁氧还蛋白中[Fe₂S₂]簇共价结合。铁硫簇是普遍存在于生物体中的最古老的生命物质之一。铁硫簇基本结构单元有[2Fe-2S]、[3Fe-4S]、[4Fe-4S]及[8Fe-7S]等几种形式,不同结构的铁硫簇具有不同的生物学功能,主要包括参与电子传递、底物的结合与激活、铁/硫的存储、基因表达的调控、酶活的调控等。铁硫簇既可在生物体内合成,也可在体外进行人工组装。铁硫簇的生物合成主要和NIF、ISC、SUF这三个系统有关。研究已确定了参与铁硫簇合成的关键蛋白,但对它们分子水平上的机制及如何进行相互作用在体内外合成铁硫簇的认识尚待进一步研究。含[2Fe-2S]簇的铁氧还蛋白在许多铁硫蛋白的成熟中起着重要的作用,也是参与铁硫簇生物合成复杂机制的重要组分之一。在支架蛋白IscA、IscS和IscU参与下,我们对缺铁铁氧还蛋白进行了体外[Fe₂S₂]簇组装。紫外吸收光谱和电子顺磁共振结果表明[Fe₂S₂]簇正确组装到铁氧还蛋白中,其体外组装可能同样遵循“AUS”模型。