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目的建立糖尿病大鼠脑缺血再灌注动物模型;观察缺血脑组织血管他丁、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性特点;研究缺血脑组织血管他丁表达与MMP-9活性的相关性;探讨它们在糖尿病脑缺血再灌注脑组织损伤中的可能的机制。方法(1)随机将健康Wistar大鼠分为假手术Ⅰ组3只,单纯脑梗死组(CI组)17只;健康GK大鼠分为糖尿病假手术Ⅱ组3只,糖尿病脑梗死组(DM+CI组)17只。将CI组及DM+CI组制作大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,1.5h后实行再灌注,按随机化原则各分为缺血再灌注3h、24h、72h、168h 4个亚组,每个亚组3-5只。(2)采用Longa 5分制评分标准对各组脑缺血再灌注后大鼠进行神经功能评分。(3)western blot法检测不同时间点血管他丁、VEGF的表达;明胶酶谱法检测MMP-9的活性;用AlphaEaseFC分析目的条带的灰度值。(4)各项计数指标应用spss13.0统计软件进行方差分析、q检验和直线相关分析。结果(1)大鼠神经功能评定结果:入选DM+CI组和CI组的大鼠清醒后均出现明显的右侧眼球下陷、眼裂变小等Horner征表现;并出现左侧前肢屈曲,向左侧转圈或向左侧倾倒,神经功能评分1～3分。假手术组大鼠也出现明显Horner征表现,但无其他神经功能缺损体征。(2)鼠脑组织中血管他丁蛋白的表达:假手术组鼠脑中可见少量的血管他丁的表达。随着缺血再灌注时间延长,DM+CI组和CI组血管他丁表达均增高,且两组血管他丁表达呈现相似的变化规律:再灌注3h开始升高,至24h达到高峰,随后逐渐降低,168h时仍高于正常水平;与相同再灌注时间点CI组相比,在24h和168h时间点DM+CI组血管他丁蛋白表达显著增高(p＜0.05)。(3)鼠脑组织中VEGF蛋白的表达:假手术组鼠脑中存在微量的VEGF的表达,随着缺血时间再灌注时间的推移,DM+CI及CI组VEGF的表达均增高,24h达高峰,168h时仍高于正常水平;与相同再灌注时间点相比,DM+CI组VEGF蛋白表达明显降低(p＜0.05或0.01)。(4)鼠脑组织中MMP-9的活性的表达:与假手术组脑组织相对比,缺血再灌注后不同时间点,DM+CI组和CI组MMP-9活性均明显增高(p＜0.01):再灌注3h开始升高,至24h达到高峰,随后逐渐降低,168h时仍显著高于正常水平;与相同再灌注时间点CI组相比,在24h、72h和168h时间点DM+CI组MMP-9活性显著增高(p＜0.05)。(5)各组不同再灌注时间点缺血区血管他丁的蛋白表达和MMP-9活性的相关性分析:随缺血再灌注时间延长,CI组及DM+CI组血管他丁的表达与MMP-9的活性均呈上升态势,缺血再灌注后24 h二者均达高峰。经直线相关分析,DM+CI组和CI组血管他丁的表达与MMP-9的活性之间均为正相关关系(r=0.8833,p＜0.05;r=0.8894,p＜0.05)。结论(1)缺血再灌注后缺血脑组织血管他丁、VEGF蛋白表达及MMP-9的活性均增强,提示血管他丁、VEGF及MMP-9在脑缺血后组织病理生理变化的过程中发挥作用;(2)与单纯脑梗死相比,糖尿病者脑缺血再灌注后VEGF蛋白表达明显降低,而血管他丁的表达及MMP-9活性明显增加,提示糖代谢异常对缺血再灌注后脑组织血管他丁、VEGF及MMP-9的表达均有显著影响;(3)单纯及糖尿病大鼠脑缺血再灌注后MMP-9活性与血管他丁表达存在直线正相关关系,提示血管他丁表达增加与MMP-9活性的增强有关。