臭氧作为现今大气对流层最重要的次生污染物,在高浓度时对地表植物尤其是森林生态系统具有很强的毒害作用,全球几乎30%的森林已遭受到03的不利影响。为研究银杏应对高浓度O3的响应机制,本研究以3年生银杏幼苗为实验材料,利用开顶箱法,以自然条件下O3浓度为对照,设置80 nmol·mol-1、 160 nmol·mol-1及200 nmol·mol-1三个03浓度梯度,探讨高浓度O3熏蒸对银杏叶片的活性氧(H2O2和O2·-)水平及膜脂过氧化程度的影响、以及对抗氧化相关酶类如过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDAR)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)、谷胱甘肽还原酶(GR)等的活性变化的影响；利用Western-Blot技术研究高浓度O3条件下,银杏叶片MAPKs信号通路的变化以及活性氧、抗氧化酶、MAPK信号通路之间的关系。结果表明：(1)低浓度O3(80 nmol·mol-1)熏蒸下的银杏叶片在整个处理期间受到的伤害程度较小；高浓度O3(160 nmol·mol-1与200 nmol·mol-1)对银杏的叶面伤害与处理时间和O3浓度呈正相关性。(2)低浓度O3条件下活性氧处在较低水平,高浓度O3处理的前期银杏叶片O2·-产生速率增加,MDA含量上升,清除活性氧的SOD、CAT、APX、MDAR、DHAR、GR活性上升,H2O2含量下降。高浓度O3处理后期(>20d),CAT、SOD、APX、DHAR, MDAR、GR等酶活性下降,O2-产生速率和H2O2含量均显著增加,MDA含量增加。 (3)O3浓度升高导致活性氧大量积累,诱导细胞内MAPKs信号通路的相关蛋白JNK、ASK1和p38的表达,ASK1是JNK蛋白激酶和p38MAPK蛋白激酶的共同上游,可以激活银杏叶片细胞中JNK、p38MAPK信号通路。综上所述,短期较高浓度O3 (80nmol·mol-1)处理可导致银杏叶片抗氧化系统活性增强,ROS含量降低。长期高浓度03胁迫可诱导银杏叶片活性氧积累,抗氧化酶活性降低,膜脂化程度加重,可激活银杏叶片内ASK1、JNK和p38蛋白激酶的表达,诱发MAPKs信号通路。