蜡蚧轮枝菌Verticillium lecanii(Zimmerman)Viegas是一种世界性广泛分布的虫生真菌，主要寄生粉虱、蚜虫等同翅目的重要农业害虫，可用于温室害虫的生物防治。为了开发利用蜡蚧轮枝菌，本文针对拥有自主知识产权的高毒力菌株CA-0319，进行菌株的发酵生物学、发酵条件以及田间应用技术的系统研究。研究结果明确了该菌株的营养需求特性，其中是一些氨基酸、维生素的促增作用，可以在大规模生产中应用，具有很高的经济价值；优化得到了高产的液体、固体培养基，摸清了罐发酵特性和技术，进行了5L、16L、100L的液体系列发酵实验，将发酵水平提高到一个新高水平，菌株液体发酵潜能得到充分发挥。具体结果如下： 1．发酵生物学 菌株孢子能快速萌发，菌落生长迅速，产孢量高。生长要求的最佳C/N比为20：1，最佳碳源浓度为1mol/L；对C、N源种类的要求，以蔗糖、可溶性淀粉、麦芽糖、纤维二糖、海藻糖为最适合，分解双糖的能力强；最有利于产孢的氮源是大豆蛋白胨和牛肉蛋白胨，其次为酵母粉。苯丙氨酸促进菌株产孢作用最大，其次为谷氨酸、甘氨酸、苏氨酸；供试的4种嘌呤碱中，只有鸟嘌呤对产孢有促进作用。 大量元素(K、P、S、Mg、Fe)缺失对液体培养产孢减产幅度为52～99.46％。其中K、P、S的影响较大，减产率均在99％以上；作用其次的为缺失Mg减产89％，以及缺失Fe减产一半。固体培养，大量元素减产影响顺序为P＞K＞Mg＞S＞Fe，减产幅度为17％～97％。微量元素Zn浓度1～100μg/mL，有明显的促进作用，过量的锌对产孢有明显的抑制作用；Al铝离子浓度1μg/mL～50μg/mL对生长有促进作用；锰离子1μg/mL～150μg/mL对产孢和菌丝生长均有不同程度的促进作用，最适浓度为50μg/mL；Mn对于产孢有促增作用；Ag银离子对产孢与生长有显著的抑制作用。Ni浓度1μg/mL显著提高产孢量及菌丝重量；Mo浓度1～25μg/mL有促增作用，大于25μg/mL有抑制作用，最佳浓度为25μg/mL，最大增产率为181.2％。烟酸10μg/mL对于菌丝具有显著的促增作用(增产33.6％)；维生素B6也有增产作用(增产率为20.2％)。 2．发酵特性与发酵技术 摇瓶发酵：初始糖浓度15～30g/L的范围，培养基装量12％(30mL/250mL)，接种量10％，前24小时温度25℃、转速210rpm，24～60小时温度降到23℃、中口农业科学阳博卜学位论义 枫蛰转速升到 250rpm，菌体生长延滞期可缩短，发酵终点提前约 10，h时，产抱量峰值提高到2．5倍。 罐发酵：SL罐发酵条件仇化设计，接种量提高到8％，25－23C变温培养，溶氧量保持 15％以上，结果产量为抱子浓度 2．2 XI 00个／mL，与 1％接种量的罐批比较无显著差异，但发酵的适宜终点为33小时，提前了约20小时。SL小罐内发酵过程中酸碱度变化幅度较小，从开始至发酵终点，pH在5．5～7．5的范围内，适于菌体的生长和产抱。 16L发酵罐，通过 4个罐批的考察，基本明确了溶氧、PH值及接种袍子类型对罐发酵过程影响的大小和方式，前期的溶氧主要影响菌丝的积累，进而影响后期的产抱量和总产量，特别是在对数主长期溶氧需要保持在40％以上；在发酵过程中菌体产酸，在的．8前后需要做一些调节，以有利于产泡。接种抱子类型以芽抱子为好，在罐内的主长速度快，可以提前下罐，缩短发酵周期。 100L发酵罐通过忧化设计，发酵周期可缩短到 30小时，产量可达到 3 XIO‘抱子／mL，菌株产抱潜能基本得到充分的发挥。3、固体发酵与应用 固体培养的营养基质以玉米。小麦为好，最大产抱量为 4．IXIO”抱子／g料（玉米）：载体中，有4种载体（谷壳、蔗渣、软木球、玉米秆碎段）应用效果较好。新组方培养基的忧化结果，4号（麦鼓 20儿玉米 10丸 高粱 20儿酵母1％）、6号（麦鼓 20％、玉米 20％、高粱 30％、酵母 0．25％）及 8号（麦鼓 30％、1米20％、高梁20％、酵母1％）配方为高产配方（6．25 XIO”～7．24 XIO”抱子／g料）。 该菌剂对烟粉虱有很好的持续控制效果，但前期对种群的减退速度很慢，显著减退需要2～3周。在白粉虱成虫数量较多的情况下，在5～7天内需要连续施菌剂2次才可以达到防治目的，如果成虫数量较少（3～5头／株），则可间隔10～14天施菌剂1 次。多数的杀菌剂对蜡蛾轮枝菌有很强的杀伤力，兼容性很差，但间隔一段时间（提前或推迟施药）施用，可以缓解这一矛盾；多数杀病毒剂和一些杀虫剂与蜡蚁轮枝菌的兼容性好，天敌昆虫食蚜瘤蚊、丽蚜小蜂可以和蜡蚣轮枝菌联合使用。