【摘 要】
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目的:研究抑癌基因PTEN启动子区域在人甲状腺乳头状癌细胞株中的甲基化状态,以及去甲基化制剂5-氮杂-2’-脱氧脱苷(5-Aza-CdR)对其影响和作用,其表达水平是否受到甲基化调控,
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目的:研究抑癌基因PTEN启动子区域在人甲状腺乳头状癌细胞株中的甲基化状态,以及去甲基化制剂5-氮杂-2’-脱氧脱苷(5-Aza-CdR)对其影响和作用,其表达水平是否受到甲基化调控,更加全面的为乳头状甲状腺癌的发生机制及治疗提供分子依据。方法通过运用甲基化特异性PCR技术(MSP)及实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)技术对人甲状腺乳头状癌B-CPAP细胞株及人正常甲状腺Nthy-ori-3细胞株使用5-Aza-CdR前后的PTEN基因甲基化变化及PTEN的m RNA表达的变化进行检测,观察PTEN基因甲基化与甲状腺乳头状癌细胞之间的关系结果(1)人甲状腺乳头状癌B-CPAP细胞株出现甲基化引物扩增片段,无非甲基化扩增片段,而人正常甲状腺Nthy-ori-3细胞株中则无任何扩增片段;(2)应用5-Aza-CdR后,抑癌基因PTEN的甲基化扩增片段亮度下降;(3)B-CPAP细胞株中存在PTEN基因m RNA表达,Nthy-ori-3细胞株中PTEN基因m RNA较少表达;(4)应用5-Aza-CdR后,抑癌基因PTEN的m RNA表达明显上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1)B-CPAP细胞株中存在PTEN基因甲基化现象,而Nthy-ori-3细胞株中则没有;(2)B-CPAP细胞株中,应用5-Aza-CdR后,PTEN甲基化现象表达明显下降;(3)在人甲状腺乳头状癌B-CPAP细胞株中,应用5-Aza-CdR后PTEN基因m RNA表达明显上升;(4)去甲基化制剂可显著诱导甲状腺癌细胞PTEN基因去甲基化并促进其表达,从而起到治疗作用。
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