论文部分内容阅读
为了寻求一种高效、安全和环保的呕吐毒素生物降解方法,降低饲料中呕吐毒素对动物的毒害作用。调查北京市养猪场所用饲料原料和全价饲料受呕吐毒素的污染情况(试验一)。试验二和试验三筛选出一株能够高效降解呕吐毒素(DON)的细菌,并同时对其特性、降解作用机制进行研究,并进行菌株饲用安全性和有效性评价试验,研究其在动物生产中的应用效果(试验四、试验五、试验六)。试验一目的是了解目前北京市养猪场所用饲料原料和全价饲料受呕吐毒素的污染情况。采集北京市15个猪场131个饲料原料及全价配合饲料,采用免疫亲和柱-高效液相色谱法测定其中呕吐毒素的含量。结果表明:饲料原料中玉米和DDGS呕吐毒素平均含量和超标率较高;麸皮、豆粕和全价饲料也受呕吐毒素不同程度的污染。试验二目的是饲料呕吐毒素(DON)降解菌的筛选及鉴定。本试验筛选出一株能够高效降解DON的细菌ANSB714,经鉴定该菌株是一株德沃斯氏菌(Devosia sp.)。试验三目的是德沃斯氏菌ANSB714降解呕吐毒素特性的研究。研究不同发酵条件对德沃斯氏菌ANSB714降解呕吐毒素的影响。降解DON的活性组分,并探索其特性。使用液质联用分析德沃斯氏菌ANSB714降解DON的代谢产物。研究发现德沃斯氏菌ANSB714可在玉米浆培养基上生长。在pH6.2-9.1左右,温度4-37℃较宽的范围内对DON具有很好的降解活性。德沃斯氏菌ANSB714降解DON的活性物质是存在于菌体细胞上的糖蛋白。DON降解途径是DON分子上的C3—OH基团被氧化为酮基。试验四目的是降解DON的德沃斯氏菌ANSB714毒理学和安全性评价试验。经毒理学试验和安全性评价试验结果判定该菌株低毒且安全。德沃斯氏菌ANSB714对三种病原菌抑制作用不明显。同时菌株在模拟胃液和小肠液条件下具有较高的存活率。试验五目的是研究德沃斯氏菌ANSB714对采食呕吐毒素污染日粮小鼠的作用效果。试验选取雄性3周龄BALB/c小鼠80只,分为4个处理,每个处理组5个重复。处理组分别为:正常日粮组,正常日粮+ANSB714组,呕吐毒素日粮组和呕吐毒素日粮+ANSB714组。试验期28天。研究结果表明,小鼠采食呕吐毒素日粮显著降低了平均日增重和日采食量(P<0.05),显著升高了血清BUN、CRE、IgA、IL-2、IL-6和TNF-α含量(P<0.05)。在饲喂DON日粮基础上添加ANSB714显著缓解了由呕吐毒素引起的小鼠生产性能的降低,改善了 DON引起的器官肿大症状,缓解了 DON引起的对免疫性能和抗氧化性能的负面影响,明显减少了 DON在肾脏中的残留。呕吐毒素日粮组出现了组织病变,在饲喂DON日粮基础上添加ANSB714,出现的病变明显减少。试验六目的是研究德沃斯氏菌ANSB714对采食呕吐毒素污染日粮生长育肥猪的作用效果。试验选用生长育肥猪25头。处理组分别为:正常日粮组,正常日粮组+ANSB714组,呕吐毒素日粮组,呕吐毒素日粮组+ANSB714组和呕吐毒素日粮组+霉菌毒素生物降解剂组。每个处理5个重复,每个重复1头猪。试验期18天。试验结果显示,饲喂DON日粮显著降低了生长育肥猪平均日增重(P<0.05),显著升高了器官指数(P<0.05),显著降低了生长育肥猪血清ALB含量,同时显著升高了血清中ALT、ALP活性以及CRE、BUN、IgA、IL-2、IL-6和TNF-α含量(P<0.05),显著降低了生长育肥猪血清和肝脏GSH-PX活性(P<0.05)。而在饲喂DON日粮的基础上添加ANSB714缓解了 DON对生长育肥猪生产性能、血清生化和免疫指标、抗氧化指标、器官指数方面的负面效应并显著减少了 DON在血清、肝脏和肾脏中的残留量。呕吐毒素日粮组出现了明显组织病变,在饲喂DON日粮的基础上添加ANSB714,出现的组织病变明显减少。而本试验中所用到的另一种霉菌毒素生物降解剂对DON负面效应的缓解作用远不及ANSB714好。综上所述,北京地区猪场饲料和饲料原料样品DON污染普遍存在。筛选出一株能够高效降解DON的德沃斯氏菌ANSB714。降解DON的作用机制是DON分子上的C3—OH基团被氧化为酮基。毒理学和安全性评价试验结果表明德沃斯氏菌ANSB714是一株低毒且安全的菌株。在饲喂呕吐毒素日粮的基础上添加德沃斯氏菌ANSB714明显缓解了小鼠和生长育肥猪DON中毒症状。