新疆部分地区奶牛隐性乳房炎大肠杆菌的初步研究

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本实验利用流行病学、微生物学及分子生物学方法,对新疆部分地区奶牛场隐性乳房炎发病情况进行了调查,并对奶牛隐性乳房炎病例中大肠杆菌的抗药性、免疫原性和菌体蛋白进行了初步研究。在调查的8个奶牛场中,隐性乳房炎的平均头阳性率和乳区阳性率分别为63.93%和31.76%,奶样中大肠杆菌的平均头分离率和乳区分离率分别为29.64%和11.86%。药物敏感性实验表明,在不同牛场,隐性乳房炎病例中大肠杆菌药物敏感性基本相同,各牛场所分离菌株均对头孢噻唑、丁胺卡那、恩诺沙星敏感。87.5%的牛场菌株对庆大霉素、卡那霉素、多黏菌素、四环素敏感。粪源性大肠杆菌药物敏感性与奶源性菌株无明显差异。用血清学方法对不同牛场所分8个菌株进行免疫原性和抗原相关性测定,有3个菌株(F95b、C150和B1c)具有很好的免疫原性,最高血清效价可达1:5120。这3株菌所制备的血清在1:80稀释条件下分别能与89.29%的被检菌株发生凝集反应,显示其具有共同的抗原性。运用分子生物学方法对分离菌株质粒进行分析,菌株的质粒检出率为95.83%(23/24),质粒图谱为6种类型,质粒DNA大小在1.3×103~1.9×104bp之间。用聚丙烯酰氨凝胶电泳对所分离菌株的菌体蛋白进行分析,呈现18~23条大小不等的蛋白条带,其分子量在5~100 kDa之间。免疫印迹分析表明,免疫血清中的抗体主要是针对分子量为70kDa或32kDa的菌体蛋白,这为大肠杆菌性奶牛乳房炎的治疗和侯选亚单位疫苗的选择提供了参考依据。
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